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【求助/交流】热不对称PCR的问题,回帖就送金币!!多谢帮忙回答的,帮顶的!! 已有12人参与
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首先,热不对称PCR的好处是什么?它主要用来扩已知序列的旁侧基因,然后通过 一步步提高退火温度,最后达到P出一条带的目的。这样理解对吗? 其次,我现在做启动子的染色体步移,加了接头后。试剂盒也是推荐用热不对称PCR。但这时我知道我的接头序列,又知道我的已知序列,完全可以用普通PCR扩嘛。这样想对吗? 还有,不太理解接头引物AP和特异性引物GSP之间在片段长度和退火上的差异。试剂盒上的:AP1:22个碱基 51度退火 AP2:19, 57度 。而建议我的GSP:25~28个碱基, 退火和GC和AP差不多。为什么碱基数差那么多? 最后,2步法PCR(94度,64度)和3步法(94,退火,72度)有什么区别?好处是? 大家一起来讨论下这四个问题吧!!多谢了~~~谢谢!!!! 回帖就有金币,每人可领5次!! |
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39楼2010-10-18 11:29:54
taigongzaici
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2楼2010-10-17 18:56:14

7楼2010-10-17 19:47:22
lhwei1987
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8楼2010-10-17 21:30:12







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