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【求助/交流】关于细胞培养的问题
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pumpkin236
铁虫
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虫号: 433783
注册: 2007-08-18
专业: 细胞增殖、生长与分化
[交流]
【求助/交流】关于细胞培养的问题
已有5人参与
最近挺郁闷,细胞出了点问题,想请教下各位高手!
我养的是NIH3T3细胞,用的PBS,DMEM,0,25%胰酶-0.02%EDTA。前段时间细胞养的好好的。现在传代后细胞根本不贴壁,基本全不贴壁,不知道为什么。貌似胰酶是新配的,有点怀疑是不是胰酶出现问题?大家觉得有没有可能,反正应该不是染菌。还有人说,是不是消化时候,消化过度,但是消化过度也不至于全不贴壁啊?况且,昨天我特意减少消化时间,结果,今天还是不贴壁。不知道大家遇到过这种情况没得
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1楼
2010-10-15 09:26:40
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caca214
银虫
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在线: 19.3小时
虫号: 1106071
注册: 2010-09-23
专业: 生物化学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
传代次数太多了吧
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4楼
2010-10-15 11:09:58
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dianaofyezi
金虫
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在线: 67.1小时
虫号: 371239
注册: 2007-05-14
性别:
MM
专业: 免疫生物学
★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+1):有道理的 2010-10-15 11:44:14
不贴壁的原因 貌似很多的样子,比如时候胰酶消化过度了,细胞受到支原体污染了,细胞瓶没有洗干净、细胞传代时间过长、培养基条件不适合等等,不知道你这个是那种呢?
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52187644
2楼
2010-10-15 11:01:27
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feng__
金虫
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雾~蝶
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沙发: 1
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在线: 312.5小时
虫号: 1061078
注册: 2010-07-20
性别:
MM
专业: 生物化学
★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+1):可以考虑的 2010-10-15 11:44:42
所有的材料和试剂养别的细胞试下,不行就重新复苏呗
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会不会偶尔也会想起我....
5楼
2010-10-15 11:17:31
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sennialiu
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+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流, 2010-10-15 13:41:34
我的体会是3t3最好每天都换液,这个细胞还比较好样,需要我可以给你一份。
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6楼
2010-10-15 12:57:56
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