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【求助】用Reed-Muench method公式与Karbers公式计算的腺病毒TCID50滴度有区别吗？
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疑问Reed-Muench method公式与Karbers公式计算的TCID50滴度有区别吗？） 以下病毒计算方法正确吗 腺病毒滴度测定方法： TCID50 纯化前的腺病毒原液测一组，纯化后的腺病毒重复测三组。 （1）将293细胞消化计数，每孔种5*103个细胞，150ul的10%血清培养基，待细胞长满90%以上，可用。 （2）用无血清培养基每组将腺病毒稀释10^（-7）,10^（-8）,10^（-9）,10^（-10）, 10^(-11),10^（-12），10^（-13）,10^（-14）,八个梯度。 （3）将96孔板中每孔吸出120ul培养基，加入100ul稀释的腺病毒。（最终孔中的血清浓度约为2%）。留一排细胞不加病毒作为阴性对照。 （4）每个稀释度做8个孔的重复。以观察该孔是否出现CPE，确定该孔是否为阳性孔。假如某个梯度8个孔中共有5个阳性孔，则将该梯度的结果记为5/8,依次类推。 （5）整理原始数据，计算各稀释度的阳性率。 （6）最后按照Reed-Muench method公式计算病毒滴度。 （疑问Reed-Muench method公式与Karbers公式计算的TCID50滴度有区别吗？） 数据汇总： 病毒液滴定情况： 病毒名称 Ad-NEP 10^-10 8/8 10^-11 7/8 10^-12 3/8 病毒液滴度计算：（ Ad-NEP） Log of virus dilution Infected test units Cumulative Infected(A) Cumulative Non-infected( B) Ratio of A/(A+B) Percent infected -10 8/8 18 0 18/18 100 -11 7/8 10 1 10/11 90.9 -12 3/8 3 5 3/8 37.5 -13 0/8 0 8 0/8 0 计算过程： Proportionate distance（Ad-NEP）=（0.909-0.5）/（0.909-0.375）=0.76 Log(ID50)=(-10)+(0.76*-1)= —10.76 则ID50=10^—10.76 则 Titer（Ad-NEP）=10*10^10.76 TCIDml-1=10^11.76 TCIDml-1 Sample Text |
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