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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
去买个marker吧,不贵的100左右可以用很多次。
再者,看你的蛋白量不少,为啥不用考马斯亮蓝染色呢?
个人认为你将分离胶的浓度增大一些可以得到更好的效果。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-10-9 at 17:32 ]
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
11楼2010-10-09 17:14:03
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agtc

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不错啊,我第一次做好没这个好呢!把分子克隆上的这一部分好好看看,严格按照描述的步骤做,应该会做好的。
慢慢的走是为了走的更远!
12楼2010-10-09 17:29:51
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kxxin66

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励下~ 2010-10-10 09:30:17
胶跑得挺好呀,可能是样品没处理好的原因,上面的那一片像是都降解了,与胶无关。还有一点就是胶怎么这么脆,应该看一下是是自己没启好还是丙烯酰胺与甲叉比例有问题。很多生物公司代理都卖大分子量的Mark。
13楼2010-10-09 20:02:25
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kxxin66

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
给你个建议:换考染吧,要么银染时条带显色就终止,效果会更好
14楼2010-10-09 20:04:32
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suwei658

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-10-09 17:14:03:
去买个marker吧,不贵的100左右可以用很多次。
再者,看你的蛋白量不少,为啥不用考马斯亮蓝染色呢?
个人认为你将分离胶的浓度增大一些可以得到更好的效果。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-10- ...

我用的就是考马斯亮蓝染色,只是照相是黑白的而已啊
坚持到底就是胜利!
15楼2010-10-10 01:17:27
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wuyh_19820510

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议下次提问时把所有实验条件都说清楚,大家好给建议,你的样品来源是什么,如果是血清,含有大量白蛋白,也就不为奇啦,如果是原核表达产物就有问题啦。你要的蛋白是多大,如果下面就是你要的蛋白带,胶已经相对很好,可以提高下浓度,胶浓度的分离范围可以上网查查。蛋白M到处都有,上网查查。
16楼2010-10-10 11:19:49
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virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
个人觉得是你的浓缩胶做的不好,可能是浓缩胶的长度太短,可以适当加长浓缩胶的长度,浓缩时电压不要太大。
virus
17楼2010-10-10 11:31:48
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)

Mark各种大小的试剂公司都有卖啊,想跑清晰胶的话推荐一种:Tris-tricine胶。效果很好的。
18楼2010-10-10 20:51:03
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)

建议使用Tris-tricine胶。
19楼2010-10-10 20:52:21
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suwei658

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by virus2009 at 2010-10-10 11:31:48:
个人觉得是你的浓缩胶做的不好,可能是浓缩胶的长度太短,可以适当加长浓缩胶的长度,浓缩时电压不要太大。

电压大多才好啊?
坚持到底就是胜利!
20楼2010-10-10 21:32:59
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