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zhtongshi

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】PCR求助

pcr实验
做总DNA的PCR时，第一次能成功的做出来，而且做得非常好，但接下来再怎么做都失败。非常着急，请高人指点！

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1楼 2010-09-23 10:07:00

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zking5129

铁虫 (初入文坛)

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DNA降解的可能性比较大，不过另外，配体系的试剂也不能反复冻容，尤其dNTP

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11楼2010-09-25 12:05:07

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qiangfeng

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5):欢迎分享经验！ 2010-09-23 19:02:22
zhtongshi(金币+1): 2010-09-28 09:26:24

我认为原因主要有两个：
1. 你第一次成功可能是总DNA提取后就立即做PCR，这时总DNA是完整的，
总DNA放一段时间后，总DNA已降解或受到损伤，使目的基因无法获得
2. 可能是你做PCR时用到的试剂出问题了，可以换用新试剂试试
另外，再问一下，你是用什么试剂提取的总DNA？
PCR时，都用的哪些公司的试剂？

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