应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 【求助/交流】悬浮细胞附着壁底的问题 K562
91/1返回列表
查看: 2464  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】悬浮细胞附着壁底的问题 K562 已有4人参与

据养悬浮细胞朋友的经验介绍，有部分细胞附着在瓶壁是正常的，可是我的细胞大多是附着在壁底的！这是不是说明细胞出了问题？直接吹打是可以吹打下来的。
另外，如何判断悬浮细胞长满呢？我最近都是根据培养液颜色判断的，有点变黄时就传代。同时我的细胞大多附在壁上了，几乎贴满时我也要传代。我状的是K562细胞。谢谢！

[ Last edited by 蜗牛VS蜗牛 on 2010-9-18 at 09:09 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-18 09:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovetanyang

银虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1):鼓励一下！ 2010-09-18 19:58:03
根据培养基的颜色判断是非常不合理的一种传代方式，当培养基变黄时，营养已经收到了影响，特别严重的是细胞生长受到抑制，对于你的实验影响比较大。合理的办法是采用计数的方法，控制细胞的密度，在达到一定密度时立即进行传代，这样才能维持细胞的正常生长。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-09-18 09:42:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by lovetanyang at 2010-09-18 09:42:05:
根据培养基的颜色判断是非常不合理的一种传代方式，当培养基变黄时，营养已经收到了影响，特别严重的是细胞生长受到抑制，对于你的实验影响比较大。合理的办法是采用计数的方法，控制细胞的密度，在达到一定密度时 ...

谢谢指点。
你说的可行，养上几代凭经验观察一下就可以了。
最开始时候的判断方式是如何的呢，什么数量才算是长满？
赞一下 回复此楼
3楼2010-09-18 12:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovetanyang

银虫 (小有名气)
蜗牛VS蜗牛(金币+5):非常感谢，说的很清楚。 2010-09-18 15:59:06
引用回帖:
Originally posted by lovetanyang at 2010-09-18 09:42:05:
根据培养基的颜色判断是非常不合理的一种传代方式，当培养基变黄时，营养已经收到了影响，特别严重的是细胞生长受到抑制，对于你的实验影响比较大。合理的办法是采用计数的方法，控制细胞的密度，在达到一定密度时 ...

依照CHO细胞（悬浮培养）为例:接种密度控制在1-3×10^5cells/ml就可以，有时0.2-0.5×105cells/ml的低密度接种也是可以的，不必把密度接种很高，这样影响细胞的生长，也增加培养基的消耗和人工。当细胞的密度增加到6-10×10^5cells/ml时（通常用72hrs）就对细胞进行传代。维持低细胞密度是非常好的办法。经常计数，是掌握细胞生长规律最好的办法。
赞一下 回复此楼
4楼2010-09-18 15:10:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovetanyang

银虫 (小有名气)
还有一点就是你说的凭经验判断细胞密度的办法，这个办法的误差非常大，即使是非常有经验的实验人员，也会产生1倍或者好几倍密度的差异，这就是说经验判断无法代替计数。计数可以控制细胞在稳定周期内传代，这种方法比传代周期不定要好的很多。
赞一下 回复此楼
5楼2010-09-18 15:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langzhiya

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+5): 鼓励新虫回帖！ 2011-10-03 11:00:57
其实k562细胞长的很快，贴壁越多说明细胞状态比较好，有利于实验....
赞一下(2人) 回复此楼
学无止境
6楼2011-10-03 10:59:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卡卡小西

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我的也是大部分贴壁啊，也是K562，复苏的是13年3月份，一直在-80保存的 ，复苏后状态也不是很好。。。同求助，，。。。悬浮的很少啊。。。。好着急好着急，复苏了好几支都是这样啊，，是因为一直在-80保存的么？？？？
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-13 15:01:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkzhangchi

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 卡卡小西 at 2014-03-13 15:01:28
我的也是大部分贴壁啊，也是K562，复苏的是13年3月份，一直在-80保存的 ，复苏后状态也不是很好。。。同求助，，。。。悬浮的很少啊。。。。好着急好着急，复苏了好几支都是这样啊，，是因为一直在-80保存的么？？？ ...

你要做K562的转染么？
赞一下 回复此楼
8楼2014-06-09 16:15:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yuga93

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
K562太多的时候就回贴壁，下次传代的时候全收起来离心，一般分冻起来，一部分传代，控制下量，要多去看
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-19 21:04:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蜗牛VS蜗牛 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +11 花田半亩～白 2026-04-21 11/550 2026-04-22 18:21 by maolC
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +5 yexuqing 2026-04-19 5/250 2026-04-22 10:01 by easeheart
[论文投稿] 急需审稿人！！！ +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭