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windbells636

金虫 (小有名气)

[交流] 【专题】MCF-7培养

我最近培养的MCF-7细胞长的不好啊
1·贴壁率不好啊,没有像以前一样是长条三角形的,很多事有点园形的,不用胰蛋白酶消化就能吹下来
2·死亡率较高啊,培养一天后培养基中漂浮的细胞数就比较多
我用的是1640培养基,10%新生牛血清,40单位/L胰岛素
跪求高人指点啊,谢谢了
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yaushz

木虫 (正式写手)

windbells636(金币+1):复苏了也是一样的 2010-09-17 11:08:41
扔了,复苏新的。
长的不好原因很多
3楼2010-09-17 00:47:58
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zplipeng

金虫 (著名写手)

还没有养,,,一起等高人啊
加油哦↖(^ω^)↗,O(∩_∩)O哈哈~
2楼2010-09-16 20:09:01
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

windbells636(金币+3):谢谢,不过条件有限暂时无法换培养基啊 2010-09-17 11:08:25
用DMEM.

[ Last edited by 雪山飞狐7233 on 2010-9-17 at 12:48 ]
梦在路就在!
4楼2010-09-17 05:38:00
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yaushz

木虫 (正式写手)


silicare(金币+1):谢谢参与 2010-09-17 22:11:17
windbells636(金币+5): 2010-09-18 14:32:15
1640和DMEM都差不多的,我两种都用过。你复苏也一样的,第一,是否冻存的时候细胞状态不好?第二,冻存时间是否过长?冻在哪里?-80°冰箱还是液氮?一般来说冻在液氮里的细胞状态和复苏前的都差不多,除非是液氮中间用完了,使冻的温度发生了改变,第三,如果刚复苏挺好, 但过了一段时间不好了,那就要考虑自身问题了,是否血清分装了?是否时间过长?是否培养基用的时间过长?细胞的背景是不是发黑?在高背景下观察背景中有没有会动的东西?
总之要考虑的因素太多了,一点一点排除
5楼2010-09-17 20:39:40
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