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xukun1176

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】我走高效液相色谱的基线为什么会这样?(这次图可以看到了) 已有13人参与

我用HPLC来分离多肽,用的柱子是C18
第一张图的流动相是:
   A:H20(含0.1%TFA)   B:乙腈(不含TFA)
第二和三张图的流动相是:
   A:H20(含0.1%TFA)   B:乙腈(含0.1%TFA)

洗脱条件均为:
                   A(%)             B(%)
0min                 95                   5
10min               95                   5
60min               0                   100
70min               0                   100
流速为1ml/min;

其中:第一张图与第二、三张图是分别在不同的地方走了,用的柱子也不同。
第三张图走的是制备型的C18,但是柱子材料和第二张图的完全一样。

那请问大家,为什么当我的目标峰出现后,基线总是会飘移呢?而且还是B中未加TFA的向下飘,加了TFA的向上漂,什么原因呢?那要怎么做才能抑制基线漂移呢?

另外,为什么走制备型的C18,我的目标峰会变成波浪状的山包呢?
谢谢!!!

图(1)乙腈中未加TFA

图(2)乙腈中加了TFA

图(3)制备型C18,流动相条件和柱子填料与(2)图相同,乙腈中加了TFA
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jiangyaling

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我走的基线飘逸更厉害,而且峰形很乱。。。
14楼2010-09-16 20:44:55
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