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【求助】免疫组化
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liulubing
银虫
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【求助】免疫组化
已有8人参与
我要做大鼠脑组织免疫组化的相关蛋白表达,方法是用免疫组化法,不知道组织处理需要注意些什么。可以固定多长时间?因为我的实验时磊样本的,所以就需要固定时间很长,且不一,会不会影响免疫组化结果呀?
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1楼
2010-09-07 23:26:33
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liulubing
银虫
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专业: 神经生物学
引用回帖:
Originally posted by
21102110
at 2010-09-08 21:41:56:
用多聚甲醛心脏灌流,次日更换固定液,此后每周更换即可
这几个的一抗santa cruz的即可,二抗,你若有钱的话就用jackson or invitrogen的Alexa系列,没钱就买碧云天的也行
请问国产的一抗都做不出来吗?比如北京博奥森、武汉博士德等?还有原位细胞凋亡检测试剂盒(TUNEL)碧云天的可以吗?我本想在实验开始前做做预实验,但是看进口的都很贵呀,不知道可不可以将组织制成蜡块后再买来试剂做预示可以不?
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9楼
2010-09-08 22:38:30
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jxx0311
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-09-09 00:02:40
一般固定液与检材体积比为 1∶ 10 左右为宜, 器官组织完全浸泡于固定液中, 固定时间 3~ 7 d。全脑应线绳悬吊固定,如果固定的器官较大、 容器较小或固定液较少时, 应于固定 3 d 内, 翻动器官或更换固定液, 以免大器官贴壁面压平和固定不良。
固定液过浓或过稀释, 渗透组织的能力就差, 组织固定不均匀, 出现中央区组织固定不良。
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失去也许意味着换一种方式拥有。
2楼
2010-09-08 08:42:26
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Elffeng
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专业: 中药药代动力学
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
如果担心外固定不全,还可以联合内固定
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Elffeng
3楼
2010-09-08 09:37:37
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mafang68
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专业: 免疫生物学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
组化所需组织应新鲜,离体后尽快固定。固定时间至少24小时,时间长了3月半年的也没问题
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木虫啦,哈哈
4楼
2010-09-08 10:31:29
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