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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】我老师设计的对吗？
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lxx213

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】我老师设计的对吗？ 已有6人参与

大家好，我是一个分子生物学新手，关于分子克隆方面做的实验不多，关于TEV酶切位点的问题让我十分困惑！请大家帮我解决一下。
TEV酶常被用于分子克隆中，用于目的蛋白与融合标签之间插入，以切除融合标签等，应在短肽ENLYFQG的Q和G之间切开，我的实验中TEV的基因序列是老师帮忙设计的，可是基因翻译后的序列是ENLYFQGSG，我想问一下大侠们，这样有没有问题？结果方面会不会受影响？
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1楼 2010-09-04 16:40:41
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jasco

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):解释的不错~ 2010-09-08 09:44:35
引用回帖:
Originally posted by lxx213 at 2010-09-08 08:37:40:

我们设计的是ENLYFQGSG，理论上是ENLYFQG，在Q和G之间切开啊~~~那不就多了SG吗？

GSG是一般常用的连接蛋白的柔性肽，对蛋白功能几乎没有影响，所以肯定是你老板有意这样设计的，用蛋白酶切后会在n端多SG
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8楼2010-09-08 08:43:27
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linysm

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你老板可能根据经验多加了两个保护氨基酸便于酶切，应该不影响吧。
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2楼2010-09-04 17:27:09
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lxx213

新虫 (初入文坛)

可是？？

引用回帖:
Originally posted by lxx213 at 2010-09-04 16:40:41:
大家好，我是一个分子生物学新手，关于分子克隆方面做的实验不多，关于TEV酶切位点的问题让我十分困惑！请大家帮我解决一下。
TEV酶常被用于分子克隆中，用于目的蛋白与融合标签之间插入，以切除融合标签等，应在 ...

可是，我们是想研究目的蛋白的结构与功能之间的关系，如果这样，结构难道不受影响吗？？
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3楼2010-09-07 08:36:34
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lxx213

新虫 (初入文坛)

可是？？

引用回帖:
Originally posted by linysm at 2010-09-04 17:27:09:
你老板可能根据经验多加了两个保护氨基酸便于酶切，应该不影响吧。

可是，我们是想研究目的蛋白的结构与功能之间的关系，如果这样，结构难道不受影响吗？？
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4楼2010-09-07 08:38:29
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