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lxx213

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】我老师设计的对吗? 已有6人参与

大家好,我是一个分子生物学新手,关于分子克隆方面做的实验不多,关于TEV酶切位点的问题让我十分困惑!请大家帮我解决一下。
TEV酶常被用于分子克隆中,用于目的蛋白与融合标签之间插入,以切除融合标签等,应在短肽ENLYFQG的Q和G之间切开,我的实验中TEV的基因序列是老师帮忙设计的,可是基因翻译后的序列是ENLYFQGSG,我想问一下大侠们,这样有没有问题?结果方面会不会受影响?
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jasco

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):解释的不错~ 2010-09-08 09:44:35
引用回帖:
Originally posted by lxx213 at 2010-09-08 08:37:40:

我们设计的是ENLYFQGSG,理论上是ENLYFQG,在Q和G之间切开啊~~~那不就多了SG吗?

GSG是一般常用的连接蛋白的柔性肽,对蛋白功能几乎没有影响,所以肯定是你老板有意这样设计的,用蛋白酶切后会在n端多SG
8楼2010-09-08 08:43:27
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linysm

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你老板可能根据经验多加了两个保护氨基酸便于酶切,应该不影响吧。
2楼2010-09-04 17:27:09
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lxx213

新虫 (初入文坛)

可是??

引用回帖:
Originally posted by lxx213 at 2010-09-04 16:40:41:
大家好,我是一个分子生物学新手,关于分子克隆方面做的实验不多,关于TEV酶切位点的问题让我十分困惑!请大家帮我解决一下。
TEV酶常被用于分子克隆中,用于目的蛋白与融合标签之间插入,以切除融合标签等,应在 ...

可是,我们是想研究目的蛋白的结构与功能之间的关系,如果这样,结构难道不受影响吗??
3楼2010-09-07 08:36:34
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lxx213

新虫 (初入文坛)

可是??

引用回帖:
Originally posted by linysm at 2010-09-04 17:27:09:
你老板可能根据经验多加了两个保护氨基酸便于酶切,应该不影响吧。

可是,我们是想研究目的蛋白的结构与功能之间的关系,如果这样,结构难道不受影响吗??
4楼2010-09-07 08:38:29
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