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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】液相色谱 基体效应
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yuanya225

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】液相色谱 基体效应

本人做中药中有效成分提取-液相色谱分析，对于某种特定有效成分的定量我是这样进行的。
先用甲醇配置该有效成分的一系列标准溶液，进液相色谱分析，以标样浓度为横坐标，液相色谱峰面积为纵坐标绘出标准曲线。
然后将中药提取液在相同色谱条件下进HPLC分析，得出峰面积，接着根据标准曲线方程求出中药中该有效成分浓度，这样做对吗？
这种定量的方法是叫外标法还是内标法？
基体效应怎么校正？
急急急。。。。。。。。
请各位大侠们指教！！！
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1楼 2010-09-02 10:37:08
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qingfanqie

金虫 (小有名气)
是外标法，可以用提取液做为溶液，配制成标准溶液，要选择标准曲线中的一点，与甲醇配制标准的响应面积作对比
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2楼2010-09-02 11:32:07
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yuanya225

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qingfanqie at 2010-09-02 11:32:07:
是外标法，可以用提取液做为溶液，配制成标准溶液，要选择标准曲线中的一点，与甲醇配制标准的响应面积作对比

请问怎么对比呢？原提取液里有该有效成分（假如有a g），如若再添加有效成分的标样（假如是b g），那峰面积（a+b g）肯定比用甲醇配置(同样是b g)的大；
是不是得先除掉提取液中的有效成分？可怎么除呢？
还有比值在哪个范围说明基体效应影响不大呢？
要是很大的话，怎么对其进行校正，然后对中药中有效成分准确定量呢？
谢谢了！！！
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3楼2010-09-02 12:19:54
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qingfanqie

金虫 (小有名气)
yuanya225(金币+10): 2010-09-07 10:52:55
只能理论上认为提取已经完全，对于加入的b是已知量，用总的面积减去提取液的面积作为b的面积，然后与标曲该点的面积对比，以此判断基体效应程度。但对于这类实验的多大范围基体效应影响不大，还要查一些文献资料吧，不敢妄说。如果大，可以考虑用提取液配制标曲来进行定量

都是个人看法，请大家指正
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4楼2010-09-02 13:06:22
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兔子不乖

金虫 (正式写手)
yuanya225(金币+5): 2010-09-07 10:53:08
考察基体效益，做回收率试验，如果能达到要求，说明基体不影响；还要看基体是否出峰，做空白试验。如果都能通过，就行了。如果不行，加内标，以内标定量。
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5楼2010-09-02 15:06:36
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