应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】加裂解液后离心到底需不需要冷冻离心？困惑。。。
61/1返回列表
查看: 2238  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

peximin

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】加裂解液后离心到底需不需要冷冻离心？困惑。。。

记得前一段时间和大家交流过这个问题，我在超声破碎大肠杆菌，加裂解液后离心，此时需不需要冷冻离心，大家意见很一致，为了防止蛋白降解，最好低温离心。可是我现在在一篇文献（中文）中看到这样的一段话：
在加入蛋白裂解液之前，通常需要通过低温及添加蛋
白酶抑制剂来减少蛋白的降解，因此样品一般宜保持在4℃左
右的低温，此时操作常选择在冰浴中进行，离心时设温4℃。
在加入蛋白裂解液之后，由于裂解液的主要成分尿素在低温下
会因溶解度的下降而析出，导致裂解液成分改变，影响蛋白样
品的溶解。故加入裂解液后样品置室温溶解即可。此外，还应
避免样品温度过高。尿素在高于37℃时易造成蛋白的氨甲酰
化修饰。因此加入裂解液后样品室温放置，需要离心时设定温
度以15~20℃为宜。样品制备完成后再将其分装冻存于一8O ℃。
现在我很困惑，到底哪种说法才是最好的呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-31 08:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wefghgjg

新虫 (小有名气)
peximin(金币+1): 2010-08-31 10:16:48
帮顶.
回复此楼
孤独
2楼2010-08-31 09:04:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

烟大考研

金虫 (正式写手)
peximin(金币+1): 2010-08-31 10:10:48
我们加了酶抑制剂后，用的室温离心，
赞一下 回复此楼
心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
3楼2010-08-31 09:17:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linysm

银虫 (小有名气)
★
peximin(金币+1): 2010-08-31 10:10:56
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-08-31 11:58:54
加了尿素了，蛋白已经没有活性了，还担心么？一般在尿素中不用冷冻，但温度不宜过高
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-31 09:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laren_

铜虫 (初入文坛)
peximin(金币+1): 2010-08-31 10:11:04
我们实验室裂解大肠杆菌 原来是加裂解液超声不离心 后来换成不加裂解液超声后低温离心
赞一下 回复此楼
5楼2010-08-31 09:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peximin

金虫 (小有名气)
内容已删除
回复此楼
6楼2010-08-31 10:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 peximin 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 4/200 2026-09-18 03:18 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:04 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 6/300 2026-09-18 01:54 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-18 01:54 by cITaGg3p5edr
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-17 23:28 by cuPZTDXS3VOd
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 13:39 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:05 by ObVzqQQh1rrE
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:26 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 03:52 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-17 03:16 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 21:03 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 14:27 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 02:35 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭