| 查看: 2190 | 回复: 5 | |||
[交流]
【求助/交流】加裂解液后离心到底需不需要冷冻离心？困惑。。。
|
|
记得前一段时间和大家交流过这个问题，我在超声破碎大肠杆菌，加裂解液后离心，此时需不需要冷冻离心，大家意见很一致，为了防止蛋白降解，最好低温离心。可是我现在在一篇文献（中文）中看到这样的一段话： 在加入蛋白裂解液之前，通常需要通过低温及添加蛋 白酶抑制剂来减少蛋白的降解，因此样品一般宜保持在4℃左 右的低温，此时操作常选择在冰浴中进行，离心时设温4℃。 在加入蛋白裂解液之后，由于裂解液的主要成分尿素在低温下 会因溶解度的下降而析出，导致裂解液成分改变，影响蛋白样 品的溶解。故加入裂解液后样品置室温溶解即可。此外，还应 避免样品温度过高。尿素在高于37℃时易造成蛋白的氨甲酰 化修饰。因此加入裂解液后样品室温放置，需要离心时设定温 度以15~20℃为宜。样品制备完成后再将其分装冻存于一8O ℃。 现在我很困惑，到底哪种说法才是最好的呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有134人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 离子液体及其在有机合成反应中的应用
已经有38人回复
- 液相柱子填充 仪器
已经有4人回复
- 【求助】取血离心后得血清，需不需要肝素？
已经有16人回复
- 【求助/交流】离心后的青枯菌，为什么要用pbs缓冲液洗呢？
已经有3人回复
- 【求助】离心母液收集管路安装
已经有5人回复
- 【求助】求助：不知道100ml离心管最多能装多少液体？
已经有5人回复
2楼2010-08-31 09:04:26
3楼2010-08-31 09:17:17
linysm
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 296.3
- 散金: 30
- 帖子: 184
- 在线: 86.9小时
- 虫号: 888052
- 注册: 2009-10-29
- 性别: GG
- 专业: biology
4楼2010-08-31 09:25:38
5楼2010-08-31 09:28:20
6楼2010-08-31 10:16:18
投票:
