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xhpearl

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】色谱柱坏了吗?还是只需要清洗呢?怎么清洗呢?请指教啊,着急,谢谢 已有2人参与

上次实验时可能是上样量过高了,我们柱子一般应该上10-30ug,我却一次上了100ug,结果好像就有些蛋白附着在柱子上洗不下来了。我是用梯度洗脱,最高用到80%B(95%乙腈,0.1%TFA),现在每次程序走到80%B时总会冒出比较宽大的峰,前两天还没有的。之间我除了一次上了100ug样品这次外,还用甲醇冲了4小时的柱子,冲完就把柱子用80%纯乙腈保存过夜,结果第二天用就出现了上面说的这个问题。
我该怎么办?我们柱子还没用过几次,不会就被我用坏了吧?!我好担心好害怕,这个责任可担不起啊。还请各位高手帮帮忙,指教一下。将不胜感激!
柱子是C4柱(4.6*150mm)。还需要什么信息吗?不管怎样,情各位高手抽点时间给点帮助,谢谢您了!
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xhpearl

新虫 (初入文坛)

呵呵,楼上是高手吧,不过我可不敢随便冲啊,万一不着边际的乱冲更不能用了怎么办。今天走了几个梯度还是不行,唉,为什么呢
3楼2010-08-27 16:26:01
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