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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pull down实验阴性对照也有带？
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zjwang

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】pull down实验阴性对照也有带？

最近作pull down 实验，用gst和mbp标签，用空的gst对照也能杂出mbp条带，怎么回事呢，做过的大侠指点阿，谢谢。
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1楼2010-08-25 15:27:35
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jacky1985310

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1916438楼: Originally posted by wdongdong at 2010-08-26 16:08:50
washing buffer 多洗几次，可以加大去污剂的量

你好，请问去污剂哪些比较好呢，麻烦能推荐下并给出相应的使用浓度吗？谢谢
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5楼2012-07-05 11:09:59
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zjwang

木虫 (正式写手)
做过的出出主意阿！
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2楼2010-08-25 16:39:32
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wdongdong

金虫 (小有名气)
★
zjwang(金币+1): 2010-08-26 17:08:28
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-08-26 18:18:19
washing buffer 多洗几次，可以加大去污剂的量
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3楼2010-08-26 16:08:50
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jacky1985310

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-07-05 13:38:41
我也遇到同样的问题。
现在我反过来做用Amylose去immobilize MBP然后去拉GST。小量试验成功过一次。一大量反应后又出现之前的问题了。
目前的感觉就是反应的sample浓度不是越高越好，会造成洗脱困难。
由于我用的是batch法，如果resin的含量过高的话，靠离心还是很难洗干净的。
不知道仁兄的问题解决了没有呢？多多分享下经验
失败也是宝贵的经验，分享下避免大家犯同样的错误。
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4楼2012-07-05 11:08:49
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