【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？ - 分子生物 - 综合其他

21楼2010-11-04 15:54:11

肥宝

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西瓜(金币+3): 鼓励新虫！ 2012-01-04 12:37:54

1.你诱导时的OD太高了。
2.降低IPTG的量试试，量太高也影响表达。
3.试试15度诱导过夜，对可溶性蛋白表达比较好。

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22楼2012-01-04 10:44:10

linlingdaiyu

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学习一下

23楼2012-01-04 13:41:53

flyy1986

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lZ使用的什么培养基？试试高营养培养基，然后再在OD=2的时候诱导，不知可否？

24楼2012-04-24 16:43:06

月月大可

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引用回帖:

2453974楼: Originally posted by flyy1986 at 2012-04-24 16:43:06:
lZ使用的什么培养基？试试高营养培养基，然后再在OD=2的时候诱导，不知可否？

呵呵，感谢回复啊。都毕业一年了，换新课题了

当时使用普通LB

25楼2012-04-24 21:05:56

淘淘279

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我的蛋白原核表达后也是量少所以做了两个方面的优化
1，优化密码子
2，更换自诱导培养基（含乳糖和葡萄糖）
两个优化后全细胞PAGE显示蛋白量很大
但同时另一个问题出现了，形成了包涵体
希望对你有帮助

你能做的永远不止这些！

26楼2014-09-10 18:39:24

谢晨曦

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引用回帖:

26楼: Originally posted by 淘淘279 at 2014-09-10 18:39:24
我的蛋白原核表达后也是量少所以做了两个方面的优化
1，优化密码子
2，更换自诱导培养基（含乳糖和葡萄糖）
两个优化后全细胞PAGE显示蛋白量很大
但同时另一个问题出现了，形成了包涵体
希望对你有帮助

怎么优化密码子呀

27楼2015-02-03 22:16:50