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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】HPLC制备
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damuzhi818

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC制备 已有5人参与

在制备柱上制备样品，发现在扎了几个针后，峰的保留时间出现了前移，不知道了为什么？
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1楼 2010-08-19 11:56:46
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乙酰水杨酸

木虫 (正式写手)

KOP
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-08-21 19:10:38
正常现象啊，在样品洗脱的过程中，总有很微量的样品被吸附在固定相上难以被当前流动相洗脱下来，且往往要洗脱能力更大的洗脱剂才能冲干净，这就造成固定相吸附能力下降，柱效降低了，你的样品峰自然前移了，且分离度也有一定的影响，因此你摸PHPLC条件的时候要调整流动相比例使样品峰之间有足够的分离度。如果是分析型HPLC你就要走完一个样品冲一下柱子，再平衡回来，然后进下一个样品
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浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
5楼2010-08-19 19:49:53
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dayao

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wtf66(金币+1):谢谢参与. 2010-08-22 20:20:12
这是正常情况，它出峰时间就会变，所以做起来很烦啊，动不动就要改收集条件，而且流动相需求太多，这辈子再也不做制备HPLC了
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无与伦比的美丽
3楼2010-08-19 18:28:06
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dayao

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wangwenfeng at 2010-08-19 14:25:11:
你的样品稳定吗

个人认为和样品稳定性应该没关系
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无与伦比的美丽
4楼2010-08-19 18:30:01
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damuzhi818

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 乙酰水杨酸 at 2010-08-19 19:49:53:
正常现象啊，在样品洗脱的过程中，总有很微量的样品被吸附在固定相上难以被当前流动相洗脱下来，且往往要洗脱能力更大的洗脱剂才能冲干净，这就造成固定相吸附能力下降，柱效降低了，你的样品峰自然前移了，且分离 ...

分析的很有道理，谢谢乙酰水杨酸。。。。
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寒山问拾得曰：“世人谤我、欺我、辱我、笑我、轻我、贱我、厌我、骗我，如何处治乎” 拾得云：“只是忍他、让他、由他、避他、耐他、敬他、不要理他。且待几年
6楼2010-08-20 09:31:45
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