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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】millipore超滤管超滤
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】millipore超滤管超滤

原核表达过完镍柱的样品用 1K的millipore超滤管超滤，4000g的离心力，15min 离心到外管的样品体积跟离心管里剩下的样品体积差不多，我总共有70ml左右的样品，超滤后估计还有25ml左右，这样正常吗？还是有哪里没有做好，剩这么多体积的话感觉里面咪唑残留还是有点多的。离心力估计不好改变的，因为产品写的是4000g,估计只能改时间了，不知道怎么办！请问有经验的朋友指点下！谢谢！
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1楼 2010-08-17 08:25:31
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统（国产AKTA）销售


感觉？ 如果觉得多的话就继续置换吧。  加buffer 继续超。不知道行不行。
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2楼2010-08-17 08:53:07
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bunny0512

银虫 (小有名气)
我是每次离心半小时,缓冲液补平再离心,重复2-3次
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在哪里~在哪里见过你~
3楼2010-08-17 09:05:31
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-17 16:26:14
引用回帖:
Originally posted by 辉辉集团 at 2010-08-17 08:25:31:
原核表达过完镍柱的样品用 1K的millipore超滤管超滤，4000g的离心力，15min 离心到外管的样品体积跟离心管里剩下的样品体积差不多，我总共有70ml左右的样品，超滤后估计还有25ml左右，这样正常吗？还是有哪里没有 ...

基本正常，如果担心样品，可以取出一点跑个胶看看，我也同意楼上的说法， 你可以不断加入你想置换的buffer，这样，管中的咪唑越来越少。
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4楼2010-08-17 09:12:57
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liouwzh

木虫 (正式写手)
现在的很多超滤管只能过滤一定的体积，体积多了很容易被堵住。可以再换另一个新的超滤管。
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5楼2010-08-17 11:33:58
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by liouwzh at 2010-08-17 11:33:58:
现在的很多超滤管只能过滤一定的体积，体积多了很容易被堵住。可以再换另一个新的超滤管。

那样成本太高了吧
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6楼2010-08-17 14:51:00
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
加时。。。
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7楼2010-08-17 15:48:47
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月月大可

木虫 (著名写手)
继续离心一次，离心到符合你要求的体积。
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8楼2010-08-17 16:30:46
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辉辉集团

银虫 (正式写手)
9楼2010-08-18 15:28:24
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