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辉辉集团

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】millipore超滤管超滤

原核表达过完镍柱的样品用 1K的millipore超滤管超滤,4000g的离心力,15min 离心到外管的样品体积跟离心管里剩下的样品体积差不多,我总共有70ml左右的样品,超滤后估计还有25ml左右,这样正常吗?还是有哪里没有做好,剩这么多体积的话感觉里面咪唑残留还是有点多的。离心力估计不好改变的,因为产品写的是4000g,估计只能改时间了,不知道怎么办!请问有经验的朋友指点下!谢谢!
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bunny0512

银虫 (小有名气)

我是每次离心半小时,缓冲液补平再离心,重复2-3次
在哪里~在哪里见过你~
3楼2010-08-17 09:05:31
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统(国产AKTA)销售


感觉? 如果觉得多的话就继续置换吧。  加buffer 继续超。不知道行不行。
2楼2010-08-17 08:53:07
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sqhnsd

金虫 (正式写手)

★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-08-17 16:26:14
引用回帖:
Originally posted by 辉辉集团 at 2010-08-17 08:25:31:
原核表达过完镍柱的样品用 1K的millipore超滤管超滤,4000g的离心力,15min 离心到外管的样品体积跟离心管里剩下的样品体积差不多,我总共有70ml左右的样品,超滤后估计还有25ml左右,这样正常吗?还是有哪里没有 ...

基本正常,如果担心样品,可以取出一点跑个胶看看,我也同意楼上的说法, 你可以不断加入你想置换的buffer,这样,管中的咪唑越来越少。
4楼2010-08-17 09:12:57
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liouwzh

木虫 (正式写手)

现在的很多超滤管只能过滤一定的体积,体积多了很容易被堵住。可以再换另一个新的超滤管。
5楼2010-08-17 11:33:58
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