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cddryw

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助】请教一个成分分离的问题 已有1人参与

连续萃取,过完树脂和硅胶层析之后,得到某组分H,再用制备HPLC等度分离H,得到两单峰L和M,分离取得(目标是皂苷)。
但是正相tlc点样检查的时候,L不仅出现三个面积形状一样且颜色一样的点,此外和原组分H比较,H上都没有与此三点相对应的点出现。
请教各位前辈,这个可能是正常现象,或者是其他什么原因么,如何解决。
拜谢了。
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梅花精神
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音


karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-08-23 02:31:58
讲述真乱,是不是萃取-树脂-硅胶-制备hplc后得到两个东西,进液相是不是单峰,就算薄层是3个点,液相是单峰就是一个化合物,薄层3个点怎么跑出来的,3个点的rf值和形状如何,是不是点样量太大了,板超载,薄层ph值又不对把一个跑成3个了
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-08-10 12:28:37
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cddryw

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-10 12:28:37:
讲述真乱,是不是萃取-树脂-硅胶-制备hplc后得到两个东西,进液相是不是单峰,就算薄层是3个点,液相是单峰就是一个化合物,薄层3个点怎么跑出来的,3个点的rf值和形状如何,是不是点样量太大了,板超载, ...

过完硅胶柱之后,得到了A-N,14个组分,拿其中的的H组分来进行HPLC的等度分离,其中分离出两个单峰L和M。
但是后来把L和M同原组分1H进行TLC,发现L上的三个点在原组分1H上并没呈现出来,这三个点Rf值相差很小,紧挨着的,形状大小一致。
这三个点他自己跑出来的,我没叫他出来............
哎,背师姐怀疑了语文表达能力,好伤心。
梅花精神
3楼2010-08-10 13:34:27
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

cddryw(金币+2):xiexie 2010-08-10 14:10:42
谁跟你说是师姐,是师兄

这个你应该高兴才对,3个点在薄层上分的这么完美,意味着你能得到3个结构相似的化合物,我看到斑点形状很好的3个点高兴坏了,硅胶想得到纯化何物不太容易,
个人的一点观点(我不是做中药的,我是做西药手性拆分的,不知道对不对)

1。萃取和大孔树脂只选其一,两种方法重复使用没有意义还损失样品,都是粗分离砍段

2。硅胶直接得到单一成分是可以,但是没那么简单,比如你萃取玩上柱,99:1,98:2,97:3。。。。。。一直洗脱,得到10个斑点,这10个肯定不是纯的,比如有一个点是98:2-97:3洗脱下来的,要继续分,则需要97.9:2.1,97.8:2.2。。。继续上小硅胶柱才有可能得到纯的
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
4楼2010-08-10 14:03:18
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cddryw

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-10 14:03:18:
谁跟你说是师姐,是师兄

这个你应该高兴才对,3个点在薄层上分的这么完美,意味着你能得到3个结构相似的化合物,我看到斑点形状很好的3个点高兴坏了,硅胶想得到纯化何物不太容易,
个人的 ...

厉害了,在次之前,我对这个植物做过预实验,没有用到硅胶分离,但是样品过少,从外面买来植物,当过完树脂之后用hplc检查才发现里面其它成分无敌的多,才只好又过了一道硅胶。
梅花精神
5楼2010-08-10 14:09:07
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

硅胶是必须用的,没办法绕过硅胶柱这一步,只是5,6年前手段比较少的时候是反复上硅胶柱,上完大柱上小柱,现在可以不用上那么多次硅胶柱,有制备液相,葡聚糖凝胶,ods等手段可以少上几次,但是硅胶柱必须用至少一次
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
6楼2010-08-10 14:14:20
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GWBST

金虫 (著名写手)

cddryw(金币+1): 2010-08-23 10:16:20
重新再结晶一下
事在人为
7楼2010-08-22 13:09:14
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