应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】关于液相测氨基酸的问题
51/1返回列表
查看: 2425  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hufen-0328

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】关于液相测氨基酸的问题 已有6人参与

用的是Venusil-AA氨基酸分析法测定鱼肉中的氨基酸
标样出的色谱图很好
样品出峰很少而且很小，加大浓度后还是不行
怀疑是样品水解过程中出了问题
我的水解方法：0.2g左右的鱼干粉加入5mL6mol/L的盐酸，抽真空后封口，110度
水解24h
想请问做过的朋友，我的水解过程有没有问题?再有就是水解后是什么颜色的?我的呈棕色，发现我处理的标品在放置一天后，颜色由无色变成了黄色，是不是我的样品中的氨基酸在水解的过程中已被氧化了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-09 14:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pkming

金虫 (正式写手)
hufen-0328(金币+3):专业，热心，非常感谢 2010-08-09 15:42:54
我用的不是方法包，直接用PITC衍生，普通的C18色谱柱。一般衍生是比较稳定的，PITC衍生产物比其他衍生又稳定些，但是建议现做先衍生（一般都要求这样），不要超过1d，否则衍生物不稳定。
问题我怀疑还是出现在水解这一块。建议注意一下几个方面
1、水解过程中注意充氮气，快速封口，做好保护
2、用混合氨基酸做水解对比，来验证水解对氨基酸的影响，
3、你是直接用水解样衍生的，这样不妥。应该浓缩一下，还有样品的PH对后续衍生会影响。（建议对水解后的样品做相应的处理，我认为这是关键）
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-08-09 15:16:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

pkming

金虫 (正式写手)
★ ★
zxz.1982(金币+2):感谢交流 2010-08-09 15:05:02
从你描述的情况来看，水解没有问题。水解后的颜色我做的也是这样，棕色，没问题。如果有黑色沉淀则是碳化了。
酸水解确实对某几种氨基酸有破坏作用。如果你怀疑是水解破坏了大部分氨基酸可以将氨基酸做对比水解。
水解样品的后续处理你是怎样做的，有没有损失？还有会不会水解不彻底没有将氨基酸释放出来

[ Last edited by pkming on 2010-8-9 at 14:44 ]
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-09 14:43:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufen-0328

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by pkming at 2010-08-09 14:43:50:
从你描述的情况来看，水解没有问题。水解后的颜色我做的也是这样，棕色，没问题。如果有黑色沉淀则是碳化了。
酸水解确实对某几种氨基酸有破坏作用。如果你怀疑是水解破坏了大部分氨基酸可以将氨基酸做对比水解。 ...

恩 ，有少量黑色沉淀，后续衍生方法为Venusil-AA方法包所附方法

200微升水解样品，加入20微升正亮内标，100微升三乙胺-乙腈，100微升异硫氰氨苯酯-乙腈，1h后加入正己烷400微升，取下清液过滤后进样测定，与标品的方法是一样的，但是标品有结果，样品没有。

是不是衍生产物很不稳定啊？我做了很多次，有的时候标品都没有结果，
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-09 15:00:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hufen-0328

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by pkming at 2010-08-09 15:16:35:
我用的不是方法包，直接用PITC衍生，普通的C18色谱柱。一般衍生是比较稳定的，PITC衍生产物比其他衍生又稳定些，但是建议现做先衍生（一般都要求这样），不要超过1d，否则衍生物不稳定。
问题我怀疑还是出现在水 ...

恩，我再试试，谢谢了啊！能不能给我留个邮箱，我再遇到问题可以请教你！非常感谢了！
赞一下 回复此楼
5楼2010-08-09 15:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +3 zxts12 2026-03-21 3/150 2026-03-21 16:34 by 33来了真来了
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666！
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 287求调剂 +7 晨昏线与星海 2026-03-19 8/400 2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭