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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于蛋白吸收峰
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志行天下

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于蛋白吸收峰 已有1人参与

我做多糖的分离纯化，在提完溶液的蛋白后使用紫外分光光度计扫描蛋白纯化是否完全。在溶液刚刚纯化完后立即就测效果很好，在260-280nm处没有吸收峰，但放置一段时间，大概半个小时或者更长时间，同样一份样品在260-280nm 处却又会出现吸收峰，甚是苦恼，请问可能的什么原因导致的，请高手帮助解答，不甚感谢！
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1楼 2010-08-09 11:00:55
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biowandy

木虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~ 2010-08-09 18:12:06
志行天下(金币+1): 2010-08-12 09:28:29
引用回帖:
Originally posted by 志行天下 at 2010-08-09 11:00:55:
我做多糖的分离纯化，在提完溶液的蛋白后使用紫外分光光度计扫描蛋白纯化是否完全。在溶液刚刚纯化完后立即就测效果很好，在260-280nm处没有吸收峰，但放置一段时间，大概半个小时或者更长时间，同样一份样品在26 ...

你确定前后两次的样品室完全一样，只是放置时间不同？你是否引入了其他一些东西，比如提纯完成后加入了一些保护溶剂或者加入了其他溶液以形成最终的溶液。有些溶剂也有紫外吸收的。


另外就是pH， 请问你提取的pH是多少，
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2楼2010-08-09 17:28:28
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志行天下

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by biowandy at 2010-08-09 17:28:28:



你确定前后两次的样品室完全一样，只是放置时间不同？你是否引入了其他一些东西，比如提纯完成后加入了一些保护溶剂或者加入了其他溶液以形成最终的溶液。有些溶剂也有紫外吸收的。


另外就是pH， 请问 ...

其他的条件都没有变化，也没有加入别的东西，如果说有部分溶剂挥发这倒是有可能的，PH具体的我没测，不过应该是属于偏弱酸性
请问PH对吸光度有什么影响么？
对多糖本身的活性，理化性质有什么影响？
谢谢回帖~~
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3楼2010-08-12 09:28:18
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