24小时热门版块排行榜    

查看: 1529  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

las_vip086

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物测序问题 已有5人参与

引物用的27F/1492R退火温度分别采用55和58度,电泳跑出来条带都很好,亮度也差不多,不知道拿55还是58度的PCR产物好呢,谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

las_vip086

木虫 (小有名气)

刚看了看,你大概说的是PCR之后的纯化,连接,转化,克隆的步骤,这些都让测序公司给搞的。呵呵。
11楼2010-08-03 14:53:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

shuiyue2728

新虫 (正式写手)

las_vip086(金币+1): 2010-08-03 13:28:03
建议割胶回收,连到T载体上,电专涂板,摇菌提质粒,质粒测序
2楼2010-08-03 13:09:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

las_vip086

木虫 (小有名气)

我是想做克隆文库,样品DNA为环境复杂样品,个人打算直接把PCR产物交给测序公司让他们纯化后铺板挑选100个克隆进行测序。
后续我不想自己再麻烦了,像我这样是送55度产物还是58度PCR产物好呢?谢谢!
3楼2010-08-03 13:31:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

njauzx

金虫 (小有名气)

弱弱问一下,那两个引物是什么原理?
4楼2010-08-03 13:38:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见