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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于菌种分离纯化问题
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chagn

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于菌种分离纯化问题 已有14人参与

平板划线法分离纯化两种细菌，挑取其中的一种培养后总是有比较多的另一种菌生长，怎么回事啊？做分离纯化菌种时应该注意哪些啊？如何挑选菌进行下一步培养啊？

[ Last edited by chagn on 2010-7-27 at 17:13 ]
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1楼 2010-07-27 11:46:35
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
chagn(金币+1):谢谢参与
稀释涂平板分离，不要划线。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2010-07-27 13:52:37
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rosalie161

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
确定一下你的那两个形态不同的菌不是同一种，有的菌就有两种形态，并且差别很大，同时存在。
赞一下(2人) 回复此楼
Rosalei.....
11楼2010-07-27 20:59:05
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统（国产AKTA）销售


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):呵呵 2010-07-27 23:41:15
引用回帖:
Originally posted by rosalie161 at 2010-07-27 20:59:05:
确定一下你的那两个形态不同的菌不是同一种，有的菌就有两种形态，并且差别很大，同时存在。

恩，这个情况我怎么没想到哦。
哈哈。如果可能，楼主小心把黄色和白色的菌落 都做片子看看。
活片死片都看看。
赞一下(3人) 回复此楼
12楼2010-07-27 21:08:27
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普通回帖

tongyanna

金虫 (正式写手)
★
chagn(金币+1):谢谢参与
在鉴定鉴定你挑的菌
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自己的路，自己快乐的走
2楼2010-07-27 13:12:00
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yuehaihong

银虫 (初入文坛)
★
chagn(金币+1):谢谢参与
可以先做一下平板纯化，再扩大培养，这说明你的菌种不纯，我现在也在做这个
赞一下(2人) 回复此楼
挑战每一天
3楼2010-07-27 13:38:15
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skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)
★
chagn(金币+1):谢谢参与
我觉得也应该再重新纯化，挑去单菌落在培养~~
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哎哟~可爱QQ~不错哦~~
5楼2010-07-27 13:58:43
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很想跟你走

铁虫 (小有名气)
★
chagn(金币+1):谢谢参与
做分离纯化菌种时一定要注意先消毒净化工作台，把不相干的物品拿出来。接种环要来回烧红3次以上。挑取单个菌落划线接种
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-07-27 14:18:51
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yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+5):谢谢回答 2010-07-27 14:59:54
1先配制菌浓度低的菌液，然后划线接种到平板上。如果生长为较为分散的单个菌落，那划线接种成功，否则重新再做。

2选择较纯（形态色泽，如果知道需要的菌的菌落形态就更好了），挑取一部分进行革兰氏染色并观察菌的形态或其他特征，确定是你要的菌并且无其他杂菌后再用该菌落里的菌进行扩大化培养，或划线接种于琼脂斜面进行保存。

关键就是一定要先对菌落进行鉴别
赞一下(2人) 回复此楼
今夜的寂寞，让我如此美丽。
7楼2010-07-27 14:54:25
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统（国产AKTA）销售


★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
单菌落危险。一般正常情况下是不会单菌落传代保存的。
想象一下一群里面就一个单菌。。。 如果性状（简单点说性能）变化了。那么不就杯具了末。
但是像楼主说的培养一种却长两种。可能是纯化不够好吧。也许共生。

分离注意问题嘛。多细心啦。也是做生物实验必须注意的了。
严格按照无菌要求来做。会好的。
不要总怀疑设备啊，仪器啊。自己操作做到位就会有好结果。


如果没有纯化好的话，不如多做几次单菌落分离
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8楼2010-07-27 19:19:00
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chagn

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by waiter at 2010-07-27 19:19:00:
单菌落危险。一般正常情况下是不会单菌落传代保存的。
想象一下一群里面就一个单菌。。。 如果性状（简单点说性能）变化了。那么不就杯具了末。
但是像楼主说的培养一种却长两种。可能是纯化不够好吧。也许共生 ...

谢谢啊，看过你好多回贴了，哈哈，没想到回我的了。荣兴！
估计我挑的不够好，我挑的不是单菌落的，因为两个总长在一起，黄色菌总长在白色菌上面，唉，难操作啊。。。。。。
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9楼2010-07-27 19:57:33
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liuying235

新虫 (小有名气)
或许染杂菌了吧，做的任何一步都要注意无菌操作，无菌水要灭彻底，超净台一定要干净 ，接种针要烧彻底，总之，有很多细节要注意啊
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10楼2010-07-27 20:32:12
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