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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Sephadex G-100 洗脱问题？
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quinn

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Sephadex G-100 洗脱问题？ 已有5人参与

我在用Sephadex G-100纯化蛋白，洗脱时开始还好，大概上样后5个小时，流速开始下降，用恒流泵加压没有用，反而使胶压紧，胶面下降，并且由于进柱流速增加而出柱的流速不变，使得流动相液面上升，这是为什么，感觉像是哪里堵上了，流速只有10/ml，是不是胶有问题，亲们，有谁知道啊？
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1楼 2010-07-22 21:16:47
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还是用superdex系列吧
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4楼2010-07-23 08:10:03
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cnlics

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-07-23 11:31:31
G-100,75我比较熟悉，G100胶有点软，装柱不能太高，更不能用泵加压，因为胶坍塌了，柱子内部堵死了，如果你停止加压，柱子会恢复一些原体积，但柱子实际上已经不能完全回复了，最好重新、认认真真地装好柱子，下次流速一定不能过高。

如果G75也能用，就用G75，柱子稳定性，装柱高度都比100好。
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2楼2010-07-23 07:38:59
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quinn

铁虫 (初入文坛)
谢谢，可是我样已经上了，所以现在只能慢慢过了，1ml/10min,慢慢得我心都碎了！
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古之成大事者，不惟有超士之才，亦有坚忍不拔之志
3楼2010-07-23 08:07:20
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quinn

铁虫 (初入文坛)
我刚才去看了一下，更杯具了，柱子下面靠近底部，胶已经开始开了，中间出现好多孔，可是胶面上还是有很多液体的，说明水都下不去了，哎！我可怜的样品，做了好久的。
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古之成大事者，不惟有超士之才，亦有坚忍不拔之志
5楼2010-07-23 08:22:31
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