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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】关于柱效和柱压的问题
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chunchun20

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】关于柱效和柱压的问题 已有2人参与

本人现在在做一种缓释片有关物质的分析方法验证，流动相是磷酸调PH6.0的K2HPO3的缓冲盐和乙腈，走的是梯度，以前用的柱子已经废掉了，以为是柱子老化不好用，现在买了新柱子，可是不知道为什么走两次柱压就升的很高，而且柱效下降的很厉害，不知道是什么原因，柱子用后都会用各种方法冲柱子，且冲很久，仍然没用，不知哪位大侠遇到过类似的情况？帮忙解决下，谢谢！！！
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1楼 2010-07-21 16:37:39
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jiusjiu

木虫 (正式写手)
chunchun20(金币+3):谢谢您的回复 2010-07-22 10:33:34
楼主柱压升高的原因应该是盐流动相没有过膜，这个现在生产的盐都含有很多杂质，极易造成柱子堵塞
同时建议你流动相有机相不要走太高，80%以上就不要走了

[ Last edited by jiusjiu on 2010-7-21 at 18:05 ]
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4楼2010-07-21 18:02:32
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
chunchun20(金币+5):谢谢您的回复，回的真快啊！ 2010-07-21 16:43:17
买了新柱子，可是不知道为什么走两次柱压就升的很高原因就是磷酸，磷酸盐缓冲溶液是柱子头号杀手，堵柱子那是相当的频繁，废柱子快
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-07-21 16:40:14
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
chunchun20(金币+5):真是太感谢了！！ 真是雪中送碳啊！！ 2010-07-21 16:56:09
我给你一点用磷酸盐的经验，纯个人经验，不保证对错
1。用流动相之前先冲20-25分钟甲醇水，然后再跑流动相平衡基线
2。冲柱子甲醇水一定要冲足够长时间1小时以上，甚至2小时，然后换纯甲醇
3。一旦跑上流动相，就不能停，中间一停就堵，小流速都危险，吃饭的时候最好设流速0.5
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
3楼2010-07-21 16:43:06
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
chunchun20(金币+3):谢谢您的回复 学习了 2010-07-22 10:36:17
想起来了，楼上说的没过膜是不可能的，谁都知道要过膜，有机相不超过80%是害怕有机相使其结晶，但是要求这么高的有机相也没办法，流速1ml/min开着冲超过80%问题也不是太大
磷酸盐缓冲溶液，一放置就会形成及其细小的结晶，非常密集细小，所以柱子流动相不能停，一停超过20min就堵了，而且这种晶体排列紧密，再用甲醇水冲柱子几乎就是不溶的，所以流动相一但第一天没用完，第二天一定要再次过滤一遍然后超声

[ Last edited by 致死之眠 on 2010-7-21 at 18:18 ]
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
5楼2010-07-21 18:16:49
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