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cxbaoa

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】作药物缓释利用紫外求浓度的问题!紧急求助!! 已有5人参与

导师给的两个药物,异环磷酰胺和环孢素A,两年前我就做过异环磷酰胺,没做出来,利用紫外做标准曲线求浓度的。因为异环磷酰胺是在204nm的最大吸收峰,标准曲线能做出来但是缓释的时候浓度通过标准曲线计算就忽大忽小,得不出缓释的规律。当时网上查了一下有人说200-210是紫外末端吸收,数据是不可靠的,还尝试过高效液相色谱,都没做出来,实验因此就搁置了。
现在导师又提起来,还加了一个环孢素A,我一查,晕,又是一个紫外吸收很弱的,导师认为我的实验有问题而不是紫外的原因,他甚至拿出他的博士论文,说他以前在190nm测聚丙烯酰胺的浓度都没问题。而且说高效液相也是紫外检测器,原理一样的。绝对是我实验的问题。现在有些头大。
请教大家,
1:做紫外:200左右的吸收峰是不是只要标准曲线能做出来,相关度也还不错,那就是可以测出浓度的?(不要求每个点的精确性,要求得到一个规律性的趋势就行。)确实是我自己试验的问题而与紫外无关?
2:如何正确理解紫外末端吸收?
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淡淡欢喜淡淡愁
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cxbaoa

金虫 (正式写手)


自己顶一下!
淡淡欢喜淡淡愁
6楼2010-07-23 10:35:54
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查看全部 7 个回答

pavay998

金虫 (小有名气)


cxbaoa(金币+2):谢谢参与
选择什么波长做紫外分析,除了与目标化合物的吸收峰有关外,还要看你使用的溶剂系统,不同的溶剂其使用截止波长不同,你可以查询后,再选择溶剂,看能不能在在你所要的波长处使用。
以下转自仪器信息网:
“末端吸收指的是流动相在紫外短波段的吸收。描述一种溶剂的末端吸收常用其截止波长描述。
溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,它严重干扰组分的吸收测量。
其测量是将溶剂装入1cm的比色皿,以空气为参比,逐渐降低入射波长,溶剂的吸光度A=1时的波长称为溶剂的截止波长。也称极限波长。

另外你还可以参考药典有关紫外分光光度法的要求。

[ Last edited by pavay998 on 2010-7-20 at 11:28 ]
天若有情天亦老
2楼2010-07-20 11:22:45
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音


cxbaoa(金币+2):谢谢参与
液相做不出来,除非你换检测器或者衍生化药物
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
3楼2010-07-20 12:43:53
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liunianlhm

银虫 (小有名气)


cxbaoa(金币+2):谢谢参与
我觉得紫外做不出来是非常可能的。以水为溶剂的话200左右貌似是没吸收的,但溶剂里有醇的话好像200左右吸收就比较明显。200左右短波长的药物还是用HPLC测准确点吧~~~~~
4楼2010-07-20 19:52:59
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