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cancanyeah

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何从废水驯化的污泥微生物样品里提取蛋白 已有3人参与

本人用焦化废水连续运转了1个月的试验,驯化了一批污泥,但是由于焦化废水颜色很深,污泥吸附了很多的颜色,后来取污泥样品的时候离心洗涤了20多次颜色依旧很深(离心后上清颜色很深,弃上清,加PBS再离心,颜色依旧很深,几乎和没洗一个样),但是试验需要提取微生物里的粗蛋白做紫外扫描,如果有色度的话对吸光值影响很大,现在很困惑不知道用什么方法能将蛋白提取出来并且不带任何颜色(蛋白质不能失活变性)?

已经试了很多方法:比如加活性炭、超声分散(将吸附的颜色分散掉)后再离心洗涤。。。。都没有一点效果
不知道用密度梯度离心会不会将染料弄到另一层从而和蛋白质区分开?或者用什么硫酸铵沉淀蛋白?

现在毫无进展~~大家来帮帮忙吧
谢谢大家
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看天

木虫 (知名作家)


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用了这么多方法都不行呀 那怎么办  帮顶
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
2楼2010-07-19 13:04:23
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henkally

禁虫 (著名写手)


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3楼2010-07-20 11:22:53
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cancanyeah

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-07-20 11:22:53:


如果想把菌和色素分开,我也确实不知道该如何弄。不过楼主说,是要粗蛋白分离,那就好说多了。我建议可以这样试试:超声裂解你的废水中的菌,得到粗蛋白和色素的混合物。然后可以通过柱分离(分子筛,如GE的s ...

这点我也想到过,只能试试看了,通过洗的方法貌似真的洗不掉颜色呢
4楼2010-07-20 12:24:55
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henkally

禁虫 (著名写手)


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5楼2010-07-20 12:51:26
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