应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白变异吗？
51/1返回列表
查看: 645  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chenyuqin

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白变异吗？ 已有3人参与

大家好！
   我想请教一个有关蛋白表达的问题：
   本人构建了一个原核表达载体，经过IPTG诱导，SDS-PAGE后都正确的，但是一个月后再次用该菌诱导后发现蛋白质的分子量变大了，后经过PCR、酶切验证都也是正确的。不知道什么原因造成的，恳请各位大侠指教，谢谢啦！
   是核苷酸序列发生突变了吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
where there is a will,there ia a way.
1楼 2010-07-15 21:52:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyuqin

新虫 (小有名气)
谢谢！蛋白差不多大了10KDa，用原来构建好的质粒又重新做了一次转化，SDS-PAGE后还是有这个问题，不知道什么原因。
而且，我做的蛋白是有钙结合特性的，刚开始反应都是阳性的，后来也不行了。
恳请大侠赐教！谢谢啦！
赞一下 回复此楼
where there is a will,there ia a way.
3楼2010-08-23 11:20:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的分子量变大了多少？
重新用你构建好的质粒做一次转化，用新转化的表达菌株试一下吧
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-07-16 09:28:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果表达菌，表达条件都没有变化的话，应该不会的啊，你的蛋白应该是多大？会形成2聚体么？。。。。

帮顶一下
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-23 13:03:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyuqin

新虫 (小有名气)
差不多33KDa,根据预测的结果，该蛋白本身就是二聚体，现在重新表达后跑胶显示43KDa左右，也没有钙结合活性了。不知道什么原因
赞一下 回复此楼
where there is a will,there ia a way.
5楼2010-08-23 17:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料化工调剂 +5 今夏不夏 2026-03-01 5/250 2026-03-01 10:46 by ms629
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 290求调剂 +6 材料专硕调剂； 2026-02-28 7/350 2026-03-01 09:21 by L135790
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 材料类求调剂 +7 wana_kiko 2026-02-28 7/350 2026-03-01 07:55 by ms629
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭