应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白变异吗？
51/1返回列表
查看: 653  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chenyuqin

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白变异吗？ 已有3人参与

大家好！
   我想请教一个有关蛋白表达的问题：
   本人构建了一个原核表达载体，经过IPTG诱导，SDS-PAGE后都正确的，但是一个月后再次用该菌诱导后发现蛋白质的分子量变大了，后经过PCR、酶切验证都也是正确的。不知道什么原因造成的，恳请各位大侠指教，谢谢啦！
   是核苷酸序列发生突变了吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
where there is a will,there ia a way.
1楼 2010-07-15 21:52:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的分子量变大了多少？
重新用你构建好的质粒做一次转化，用新转化的表达菌株试一下吧
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-07-16 09:28:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyuqin

新虫 (小有名气)
谢谢！蛋白差不多大了10KDa，用原来构建好的质粒又重新做了一次转化，SDS-PAGE后还是有这个问题，不知道什么原因。
而且，我做的蛋白是有钙结合特性的，刚开始反应都是阳性的，后来也不行了。
恳请大侠赐教！谢谢啦！
赞一下 回复此楼
where there is a will,there ia a way.
3楼2010-08-23 11:20:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果表达菌，表达条件都没有变化的话，应该不会的啊，你的蛋白应该是多大？会形成2聚体么？。。。。

帮顶一下
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-23 13:03:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyuqin

新虫 (小有名气)
差不多33KDa,根据预测的结果，该蛋白本身就是二聚体，现在重新表达后跑胶显示43KDa左右，也没有钙结合活性了。不知道什么原因
赞一下 回复此楼
where there is a will,there ia a way.
5楼2010-08-23 17:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chenyuqin 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +4 安忆灵 2026-03-22 5/250 2026-03-22 11:09 by 杨杨杨紫
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 311求调剂 +13 冬十三 2026-03-15 14/700 2026-03-21 22:10 by peike
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 281求调剂（0805） +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭