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zhucf1755

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】氧自由基的测定已有9人参与

超氧阴离子自由基的测定，原理是过硫酸铵/N,N,N′,N′-四甲基乙二胺体系所产生的氧自由基，氧自由基与羟胺溶液反应生成亚硝酸根离子,在经对氨基苯磺酸和α-萘胺显色在波长530nm处有专一吸收峰,其颜色深浅与产生的O·2呈量效关系。我测定波长时遇到问题，在相同的波长下不同时间下的波长是不一样的，而且下降，溶液颜色初看时橙黄色，在很亮的地方看是粉红色，而且吸光度随波长580-320逐渐增加，一开始是0.001，到后面就到3了，从370nm后变化的最快，我是按着实验步骤来的，可是怎么会出现这种情况，请高手指教，不胜感激！！！！！！！！！

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1楼 2010-07-04 16:26:20

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dj04164

木虫 (正式写手)

应助: 12 (小学生)
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专业: 生物医用高分子材料

★ ★
zhucf1755(金币+5):谢谢参与
americanyk(金币+1):Thank you 2010-07-06 09:51:19
zhucf1755(金币+1): 2010-07-06 19:37:34

Lz的办法还真不太了解，如果成功一定要整理成protocol 分享一下jiajiang@cityu.edu.hk
我简单谈谈另一个检测方法：
dihydroethidium 可以被-O2氧化成Ethidium bromide (EB)。EB有荧光mircoplate reader 就可以读出来。这个办法我只在细胞里试过，可以。氧自由基的半衰期都不长，最长的也不过1秒。实验都不太稳定。