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lohas

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】分光光度计测大肠杆菌浓度 已有5人参与

我用分光光度计测大肠杆菌10^5cfu/ml的吸收值,只有在260nm处观察到很小的吸收峰,在600nm处根本没观察到。我想请问是否菌液应该在染色后才能观察到吸收峰,所用的溶剂是否就一般生理盐水就可以了。具体的操作是怎么样的,大肠杆菌用的是什么染色剂。
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旺~
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看天

木虫 (知名作家)

lohas(金币+1): 2010-07-05 11:10:51
引用回帖:
Originally posted by lohas at 2010-07-04 15:51:33:
我用分光光度计测大肠杆菌10^5cfu/ml的吸收值,只有在260nm处观察到很小的吸收峰,在600nm处根本没观察到。我想请问是否菌液应该在染色后才能观察到吸收峰,所用的溶剂是否就一般生理盐水就可以了。具体的操作是怎 ...

一般不需要染色 直接悬浮液测定就好了 怎么可能没吸收值 不知道怎么回事
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
2楼2010-07-04 17:27:14
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

lohas(金币+1): 2010-07-05 11:10:56
最好先做一个全波长扫描试试,哪能这么肯定就下结论。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
3楼2010-07-04 17:38:14
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-05 08:39:07
lohas(金币+1): 2010-07-05 11:10:45
引用回帖:
Originally posted by lohas at 2010-07-04 15:51:33:
我用分光光度计测大肠杆菌10^5cfu/ml的吸收值,只有在260nm处观察到很小的吸收峰,在600nm处根本没观察到。我想请问是否菌液应该在染色后才能观察到吸收峰,所用的溶剂是否就一般生理盐水就可以了。具体的操作是怎 ...

OD600达到0.5左右时,其对应的菌浓度大约为10^7。普通LB培养基的本底OD大约为0.2左右(稍微有些上下浮动)。lz600nm没有光吸收,应该是误差造成的。

祝顺利!
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
4楼2010-07-04 17:55:14
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-05 08:39:16
lohas(金币+2): 2010-07-05 11:10:36
不用染色,用分光光度计测有一个测量范围的,测菌体浓度一般用OD600的,一般情况下在10~7这个数量级上才能测的出来,你的太稀了。用260的话要先破壁一下,是一种更间接的方法,所以情况就更复杂
5楼2010-07-05 00:33:51
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lohas

银虫 (正式写手)

好的,我再试试
旺~
6楼2010-07-05 11:11:06
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
谢lz给金币啊,呵呵~
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
7楼2010-07-05 11:14:41
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