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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分光光度计测大肠杆菌浓度
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lohas

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】分光光度计测大肠杆菌浓度 已有5人参与

我用分光光度计测大肠杆菌10^5cfu/ml的吸收值，只有在260nm处观察到很小的吸收峰，在600nm处根本没观察到。我想请问是否菌液应该在染色后才能观察到吸收峰，所用的溶剂是否就一般生理盐水就可以了。具体的操作是怎么样的，大肠杆菌用的是什么染色剂。
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旺~
1楼 2010-07-04 15:51:33
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-05 08:39:16
lohas(金币+2): 2010-07-05 11:10:36
不用染色，用分光光度计测有一个测量范围的，测菌体浓度一般用OD600的，一般情况下在10~7这个数量级上才能测的出来，你的太稀了。用260的话要先破壁一下，是一种更间接的方法，所以情况就更复杂
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5楼2010-07-05 00:33:51
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看天

木虫 (知名作家)
lohas(金币+1): 2010-07-05 11:10:51
引用回帖:
Originally posted by lohas at 2010-07-04 15:51:33:
我用分光光度计测大肠杆菌10^5cfu/ml的吸收值，只有在260nm处观察到很小的吸收峰，在600nm处根本没观察到。我想请问是否菌液应该在染色后才能观察到吸收峰，所用的溶剂是否就一般生理盐水就可以了。具体的操作是怎 ...

一般不需要染色 直接悬浮液测定就好了 怎么可能没吸收值 不知道怎么回事
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
2楼2010-07-04 17:27:14
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
lohas(金币+1): 2010-07-05 11:10:56
最好先做一个全波长扫描试试，哪能这么肯定就下结论。
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
3楼2010-07-04 17:38:14
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-05 08:39:07
lohas(金币+1): 2010-07-05 11:10:45
引用回帖:
Originally posted by lohas at 2010-07-04 15:51:33:
我用分光光度计测大肠杆菌10^5cfu/ml的吸收值，只有在260nm处观察到很小的吸收峰，在600nm处根本没观察到。我想请问是否菌液应该在染色后才能观察到吸收峰，所用的溶剂是否就一般生理盐水就可以了。具体的操作是怎 ...

OD600达到0.5左右时，其对应的菌浓度大约为10^7。普通LB培养基的本底OD大约为0.2左右（稍微有些上下浮动）。lz600nm没有光吸收，应该是误差造成的。

祝顺利！
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
4楼2010-07-04 17:55:14
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