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an2008

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于构建RNAi载体 已有6人参与

我现在想要构建RNAi载体，想问大家一下：构建RNAi载体，两个臂长度有没有要求？发卡那个环的长度呢？请指教一下，谢谢！

[ Last edited by an2008 on 2010-7-5 at 10:57 ]
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1楼 2010-07-03 21:29:21
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
an2008(金币+1):多谢了 2010-07-04 09:48:44
好多商业化的载体 瞅瞅它们的吧。。。看过但是没有记住。。。。
好像对中间不配对的部分有要求，不能太短。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-07-03 21:47:12
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zemin_fang

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
共同学习下
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3楼2010-07-03 23:36:57
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-04 09:16:56
an2008(金币+2):你做过，是吗？麻烦具体说一下 2010-07-04 09:48:20
两臂长度大约500-700bp。‘发卡那个环的长度’约1kb, 如pFGC载体。
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4楼2010-07-04 09:13:49
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ymzfeng

金虫 (小有名气)
★ ★
an2008(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-04 11:01:29
插入片段长度没太多要求把
看你用的载体是哪种类型的干扰载体
你的填充片段大小是多少
像pFGC5941的内含子大小约1350bp
插入片段6500bp左右差不多了
仅供参考
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5楼2010-07-04 11:00:20
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375050424

银虫 (小有名气)
★
an2008(金币+1):谢谢参与
an2008(金币+2):两臂必须在300-500bp之间嘛？200bp行吗？中间内含子的长度有要求没？200bp左右可以吗？ 2010-07-04 21:00:10
两臂其实是同一片段，一正一反，大概是300--500bp（我们做植物方面的片段是这么大），中间是由一个intro隔开
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

爱笑的大脸猫
6楼2010-07-04 11:22:08
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
插入片段应为基因的特异序列，最好是5‘端的序列。因为有的基因本身就短，特异性的部分如果也短，250bp的片段也可以用。
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7楼2010-07-05 12:01:59
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
an2008(金币+1):谢谢参与
你的意思是构建shRNA，知道了这个名词就好办了
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8楼2010-07-05 13:39:05
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Ropan

新虫 (初入文坛)
★
an2008(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
163779楼: Originally posted by 375050424 at 2010-07-04 11:22:08
两臂其实是同一片段，一正一反，大概是300--500bp（我们做植物方面的片段是这么大），中间是由一个intro隔开

反向的片段是如何得到的呢？
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9楼2012-11-14 09:17:45
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爱笑的大脸猫

新虫 (小有名气)
★
an2008(金币+1): 谢谢参与
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 375050424 at 2010-07-04 11:22:08
两臂其实是同一片段，一正一反，大概是300--500bp（我们做植物方面的片段是这么大），中间是由一个intro隔开

你好，我是一个菜鸟，现在要做一个植物的RNAi载体，但是不会选择干扰片段，希望您可以回复一下，感激不尽！！！
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越努力，越幸运！
10楼2013-12-15 00:17:22
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