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pitty595

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】TLC分析 已有7人参与

如图,为多糖的TLC(薄层层析)结果,标准样品分别是单糖(1),四糖(4), 六糖(6), 和八糖(8)。 右边的是我的待测样品,从结果看,主要有2种寡糖,但都不和标准样品在一条直线上,没办法确认,为什么不在一条水平线上?

产物只可能是二糖,四糖,六糖,八糖中的2种,分析可能原因:
1,因为点样的样品是含有琼脂糖的,室温时会凝固在点样原点,这个是否会影响层析的移动位置?导致不跟标准品(液体的)移动在同一直线上?
2,点样量比标准品多,形成的加样圈直径比标准品大,这个是否会影响?
请求达人解答!多谢!
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ydgua

捐助贵宾 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流! 2010-07-02 18:23:17
关于原因2,是否考虑过载的问题,但从图像看,好像也不像!
2楼2010-07-02 18:10:23
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
离子效应?标样是否与反应体系使用相同的溶液?

觉得楼主提的两个想法都不是原因。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2010-07-02 19:54:08
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muchongchong838

禁虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-03 06:12:58
本帖内容被屏蔽

4楼2010-07-02 20:32:37
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pitty595

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-07-02 19:54:08:
离子效应?标样是否与反应体系使用相同的溶液?

觉得楼主提的两个想法都不是原因。

标样是别人提供的,我不知道是什么溶剂溶解的,估计跟我的不一样。这个影响大么?
5楼2010-07-03 11:56:46
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pitty595

铜虫 (小有名气)

★ ★
看天(金币+2):新虫 鼓励交流 2010-07-03 14:32:29
引用回帖:
Originally posted by muchongchong838 at 2010-07-02 20:32:37:
去做液相吧。TLC只能做粗浅的分析。为什么产物不能是二糖和五糖呢

液相做不出来,不知道是仪器不对还是什么原因,不太懂。产物只能是偶数的聚合度,这是酶的作用方式决定的。
6楼2010-07-03 11:58:30
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by pitty595 at 2010-07-03 11:56:46:


标样是别人提供的,我不知道是什么溶剂溶解的,估计跟我的不一样。这个影响大么?

在我的实验里影响很大,你的就不知道了
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2010-07-03 16:09:10
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lhy_0108

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
个人认为标样与样品应该采用相同的溶剂,另外浓度应该也有影响
lucy_2006
8楼2010-07-03 17:54:11
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一个小术士

木虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是酶解产物吗?底物是什么,如果是天然底物,存在乙酰化等修饰情况,所以大小和纯品不一样是很正常的,而且天然产物很可能是杂多糖
9楼2013-05-22 00:58:05
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wangjunlin92

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的展开剂是什么呀!我坐六糖跑不出来一个好看的点
持久恒远
10楼2016-03-05 21:51:23
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