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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】TLC分析
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pitty595

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】TLC分析已有7人参与

如图，为多糖的TLC（薄层层析）结果，标准样品分别是单糖(1)，四糖（4）， 六糖（6）， 和八糖（8）。 右边的是我的待测样品，从结果看，主要有2种寡糖，但都不和标准样品在一条直线上，没办法确认，为什么不在一条水平线上？

产物只可能是二糖，四糖，六糖，八糖中的2种，分析可能原因：
1，因为点样的样品是含有琼脂糖的，室温时会凝固在点样原点，这个是否会影响层析的移动位置？导致不跟标准品（液体的）移动在同一直线上？
2，点样量比标准品多，形成的加样圈直径比标准品大，这个是否会影响？
请求达人解答！多谢！
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1楼2010-07-02 18:06:29
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ydgua

捐助贵宾 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流！ 2010-07-02 18:23:17
关于原因2，是否考虑过载的问题，但从图像看，好像也不像！
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2楼2010-07-02 18:10:23
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
离子效应？标样是否与反应体系使用相同的溶液？

觉得楼主提的两个想法都不是原因。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2010-07-02 19:54:08
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muchongchong838

禁虫 (正式写手)
★ ★
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reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-03 06:12:58
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4楼2010-07-02 20:32:37
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pitty595

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-07-02 19:54:08:
离子效应？标样是否与反应体系使用相同的溶液？

觉得楼主提的两个想法都不是原因。

标样是别人提供的，我不知道是什么溶剂溶解的，估计跟我的不一样。这个影响大么？
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5楼2010-07-03 11:56:46
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pitty595

铜虫 (小有名气)
★ ★
看天(金币+2):新虫 鼓励交流 2010-07-03 14:32:29
引用回帖:
Originally posted by muchongchong838 at 2010-07-02 20:32:37:
去做液相吧。TLC只能做粗浅的分析。为什么产物不能是二糖和五糖呢

液相做不出来，不知道是仪器不对还是什么原因，不太懂。产物只能是偶数的聚合度，这是酶的作用方式决定的。
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6楼2010-07-03 11:58:30
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
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引用回帖:
Originally posted by pitty595 at 2010-07-03 11:56:46:


标样是别人提供的，我不知道是什么溶剂溶解的，估计跟我的不一样。这个影响大么？

在我的实验里影响很大，你的就不知道了
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2010-07-03 16:09:10
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lhy_0108

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
个人认为标样与样品应该采用相同的溶剂，另外浓度应该也有影响
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lucy_2006
8楼2010-07-03 17:54:11
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一个小术士

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是酶解产物吗？底物是什么，如果是天然底物，存在乙酰化等修饰情况，所以大小和纯品不一样是很正常的，而且天然产物很可能是杂多糖
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9楼2013-05-22 00:58:05
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wangjunlin92

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的展开剂是什么呀！我坐六糖跑不出来一个好看的点
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持久恒远
10楼2016-03-05 21:51:23
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