24小时热门版块排行榜    

查看: 1880  |  回复: 20

月月大可

木虫 (著名写手)

jiangkuo0520(金币+1):为什么包涵体不需要超声破碎呢? 2010-06-29 21:39:12
真核膜蛋白有难度。如果表达的量低SDS-PAGE检测不到可以大量培养一些,利用亲和柱富集一下再跑电泳看看。如果经验判断是包涵体的话鉴定表达与否的时候可以直接跑全菌,而无需超声破碎!
11楼2010-06-28 12:47:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingcp200320

银虫 (小有名气)

重复 做 3~5次很正常!
12楼2010-06-28 14:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)

jiangkuo0520(金币+1):正在做低温6H诱导表达 2010-06-29 21:38:47
试试低温诱导,或者就直接纯化包涵体蛋白好了~
13楼2010-06-28 15:37:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xlshanxlshan

木虫 (著名写手)

共同学习
14楼2010-06-28 15:41:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

试试融合表达
15楼2010-06-28 15:54:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

引用回帖:
Originally posted by jiangkuo0520 at 2010-06-28 09:38:27:

请问,我现在应该怎么办啊?

。。。。。。给具体实验细节,总有山人存在啊……没细节就不好说……
For my life!
16楼2010-06-28 17:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2010-06-28 15:54:49:
试试融合表达

我这就是融合表达啊
17楼2010-06-29 21:39:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)

还有人知道怎么办吗?
18楼2010-06-30 15:35:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoenwen

金虫 (小有名气)

难道转进去了都要表达吗!原核表达系统虽然强大,但也不是万能的啊。很多时候不表达。建议做一个密码子优化。换个宿主菌,换个载体。都可以尝试。
19楼2010-07-01 15:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinyaolu

木虫 (小有名气)

jiangkuo0520(金币+1):xiexie 2010-07-17 16:51:54
在确定序列无误的情况下,可以37度诱导后先跑全细胞电泳,确认是否有蛋白。分析核酸序列中大肠杆菌稀有密码子情况,更换宿主。此外,如果这个蛋白是膜蛋白的话,可能就需要花点时间长期抗战了
20楼2010-07-10 15:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiangkuo0520 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见