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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事？？急！！！
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者
引用回帖:
Originally posted by 良缘百合 at 2011-05-25 20:32:13:
你好，我想请教一下，切胶后放置一夜，是室温放置？还是4摄氏度呢？
谢谢！期待回复！

冰箱四度过夜
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好好做事，踏实做人！
31楼2011-05-27 07:33:40
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良缘百合

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by ctt1984 at 2011-05-27 07:33:40:
冰箱四度过夜

好的，太感谢了！
现在有个现象，不太明白：我昨天切胶后，用枪头捣碎，加入无菌水至没过胶，放4℃过夜。今天发现胶没溶，是放置时间不够长吗？还是要水浴下促进胶溶呢？你处理样品时有这种现象么？
赞一下(1人) 回复此楼
爱家人爱学习爱生活
32楼2011-05-27 23:30:18
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+5, EPI+1): 一并奖励哦 2011-05-30 12:48:49
引用回帖:
Originally posted by 良缘百合 at 2011-05-27 23:30:18:
好的，太感谢了！
现在有个现象，不太明白：我昨天切胶后，用枪头捣碎，加入无菌水至没过胶，放4℃过夜。今天发现胶没溶，是放置时间不够长吗？还是要水浴下促进胶溶呢？你处理样品时有这种现象么？

胶在4度不可能溶解，但是DNA会释放出来。
所以，吸取液体就够用了，不要管胶
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好好做事，踏实做人！
33楼2011-05-28 15:34:02
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良缘百合

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by ctt1984 at 2011-05-28 15:34:02:
胶在4度不可能溶解，但是DNA会释放出来。
所以，吸取液体就够用了，不要管胶

嗯 谢谢专家  
昨天P了一下 条带挺亮
赞一下(1人) 回复此楼
爱家人爱学习爱生活
34楼2011-05-30 12:06:43
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shajunji

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3466楼: Originally posted by evebobo at 2010-06-27 23:09:00:
我的DGGE胶回收后没有条带 能问下有什么问题吗？
胶回收用了两种方法都不行  不知道为什么  大家遇到过这种情况吗？
以前条带没分开的时候回收做PCR有条带 现在分开了却没了   期间换酶了
能是酶的问题吗？ 是 ...

请问你的问题最后是怎么解决的啊？我最近也遇到了同样的问题，纠结啊！
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35楼2012-04-21 23:34:52
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doubleping

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
28楼: Originally posted by ctt1984 at 2010-07-27 07:46:40
如果做得不好，你这样试一下。
你把条带切下来，泡在去离子水（胶捣碎，水没过就好）放置一夜，不要离心，直接以这个为模板进行扩增，应该没问题的。
我这边一只在用这个方法，所以祝你好运了。

放置一夜之后直接扩增吗？不用把里面的胶去掉吗？
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36楼2013-04-28 10:07:31
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w-yurong

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加无菌水4℃放置过夜后，用前摇匀，取溶液作为模板。
如果扩增不出来，可以适当调整模板量
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37楼2017-07-31 17:55:49
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