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lanlan1119

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】使用一根新柱子出现的情况,请高手帮忙!已有12人参与

昨天刚拆开了一根新柱子,用纯甲醇1ml/min的流速冲洗了半小时。今天做样的时候发现了一个很奇怪的问题,最开始早上的出峰时间是35min,到下午5点的时候已经是25min了而且每一针的时间还在往前提。这期间室温和柱温都是恒定的,不知道问题出在哪里了?请高手指点
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

zxz.1982:如果你进的是标准溶液,有鼓起我觉得应该是你柱子里面未被键合上填料下来了,或者是系统里面的脏东西出来了,不建议用纯甲醇或纯水去冲洗柱子,否则损耗很大的 2010-06-26 11:12:54
引用回帖:
Originally posted by forging at 2010-06-25 17:02:39:
可能你柱子活化时间不够,你在重新活化一下吧

还得用甲醇长时间的冲洗吗?
而且不只是出峰时间越来越靠前,峰型也越来越不好看,拖尾的同时,在峰高一半的时候还鼓起,随着时间的延长,鼓起的那块越来越明显。流动相就是0.05M的磷酸氢二钠:甲醇=85:15。不会对柱子影响那么大吧!!!
3楼2010-06-25 17:23:03
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

没人遇到这种情况吗?急
4楼2010-06-25 19:45:17
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by guoyang at 2010-06-25 20:38:56:


你用的缓冲盐的pH较高, 不知道你的柱子的pH使用范围? 是否合适?

agilent  的柱子耐2-9,我的流动相混合后PH为6.5左右,应该不会有问题
10楼2010-06-25 21:13:00
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

希望大家多给指点
11楼2010-06-25 22:49:41
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

问题解决了,是新柱子流动相平衡时间不够的原因。早上10点多到17点的样品主峰保留时间一直在往前提,18点至21点的样品保留时间就一致了。
平衡这么长时间柱子才平衡好,估计也有新柱子启开活化时间不够的原因吧。
谢谢各位的指点!
13楼2010-06-27 09:54:03
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