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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】两条相差80bp的DNA如何电泳分开
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zj408694018

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】两条相差80bp的DNA如何电泳分开 已有11人参与

我的质粒是5000bp，酶切后切成两条相差80bp的两条带，我要回收小一点的那一条，怎么样才能把它们分开呢？谢谢
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1楼 2010-06-25 11:35:38
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
2k多的片段相差80bp~~~嗯，PAGE，多跑一会儿。
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2楼2010-06-25 11:37:19
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
聚丙烯酰胺胶跑吧，就是麻烦一点

也可以用特别稀的琼脂糖跑跑试试看，估计够呛
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3楼2010-06-25 11:39:59
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking:非常不错的会员，有没兴趣加入专家顾问啊！ 2010-06-25 12:22:36
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-25 11:39:59:
聚丙烯酰胺胶跑吧，就是麻烦一点

也可以用特别稀的琼脂糖跑跑试试看，估计够呛

浓度低的琼脂糖怎么分辨80bp的差异？如果真要用琼脂糖的话，至少要2.5%以上，嗯...还不一定分得开。
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4楼2010-06-25 12:04:34
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6956677

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
聚丙烯酰胺胶跑吧
这个估计可以分开
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5楼2010-06-25 13:31:23
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dingkui

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zj408694018 at 2010-06-25 11:35:38:
我的质粒是5000bp，酶切后切成两条相差80bp的两条带，我要回收小一点的那一条，怎么样才能把它们分开呢？谢谢

跑PAGE胶，时间长一点，可能可以分离开！
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6楼2010-06-25 17:48:33
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
2%的胶 1h以上
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7楼2010-06-25 17:54:50
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mofashishe

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-26 23:20:00
在你不用回收的那个片段上多选一个酶切位点，做三酶切不就行了；

或者在你想回收的那个片段两端设引物做PCR，也能获得你想要的那段东西。
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8楼2010-06-26 22:53:58
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-27 09:03:26
引用回帖:
Originally posted by mofashishe at 2010-06-26 22:53:58:
在你不用回收的那个片段上多选一个酶切位点，做三酶切不就行了；

或者在你想回收的那个片段两端设引物做PCR，也能获得你想要的那段东西。

同意，如果只是为了回收其中的一个片段，可以选择此片段上没有但是另外一条片段上有的酶，做三酶切。。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
9楼2010-06-27 00:39:08
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追逐梦想

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by mofashishe at 2010-06-26 22:53:58:
在你不用回收的那个片段上多选一个酶切位点，做三酶切不就行了；

或者在你想回收的那个片段两端设引物做PCR，也能获得你想要的那段东西。

good idea!
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追逐梦想！
10楼2010-06-28 12:13:11
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