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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌表达问题 已有9人参与

如何让大肠杆菌中的目的蛋白在上清中表达?我的表达都在沉淀里,大家看看都有什么方法啊?
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平和悦衲!
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-24 08:35:09
最简单的,改善诱导条件,低IPTG,低转速,低温。还有可能是你用的缓冲也有问题,换一下缓冲液试试。
不行就换载体,换菌株。
再不行就麻烦了。小蛋白可以考虑包涵体复性,大蛋白就改成酵母或真核细胞(Hi5,
293等)表达吧。
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
16楼2010-06-23 13:22:50
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
直接裂解不行么?
3楼2010-06-22 16:34:53
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):是的,虽然表达量高,但是这个缺点也实在是让人有点头疼! 2010-06-22 18:28:18
换载体是一方面;另外,高表达都会产生包涵体,这是大肠杆菌表达的一个缺点!
梦在路就在!
4楼2010-06-22 16:47:56
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~

怎么直接裂解啊?我的目的产物是酶
平和悦衲!
5楼2010-06-22 16:48:30
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