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liuruijiexmc

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】做过细胞毒性实验的请进 已有6人参与

各位虫虫:
    哪位做过细胞毒性试验呀?我的化合物是国际上公认的毒性很强的毒素,作为阳性对照,(有7-8文献都是用同一细胞,同一毒素,只是剂量有所差别,但结果都是有毒性的),可是我做了好几次,细胞都长的好好的,给药24小时显微镜下看一点反应都没有,刚开始怀疑我的化合物有问题,所以专门去做了质谱,一点问题都没有,真是郁闷。哪位有经验的帮我分析分析呀!万分感激!!!还有,细胞如果死的很多,是不是不用做MTT显微镜下就能看出来。
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justdoitlt

木虫 (职业作家)

take you time

★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-06-23 22:49:06
如果细胞死的很多,显微镜是肯定能看的出来的
关于都不会死的问题,应该是化合物发生了变化,比如像氧化之类的
如果质谱没错,那么可以考虑是不是因为它的构型发生了改变,
因为有时候一种构型有活性,另一种就没有
lifeisajourney,cherishit,oritwilldestroyyou
2楼2010-06-20 11:42:25
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freshblack

金虫 (正式写手)

★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-06-23 22:49:17
剂量调整一下~下点猛药~按文献里最高剂量试试,甚至再高都可以尝试。
给药24h、或者48h,显微镜下观察,阳性药组细胞应该明显皱缩、颜色变深,说明药物还是发挥作用的。
或者你同时再尝试另一种药性药。也有可能细胞有了抗性
勤有功,戏无益,满招损,谦得益
3楼2010-06-20 22:10:18
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)


wtf66(金币+1):谢谢解答 2010-06-22 23:05:40
细胞死的话在显微镜下及可以明显看出来啦  是不是细胞有问题啊  重新复苏只细胞试试吧
4楼2010-06-22 19:28:54
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betterflower

木虫 (正式写手)


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做个时间和剂量的交叉实验,重新摸下最佳剂量和作用时间
5楼2010-06-23 10:19:53
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xiaopangqd

银虫 (正式写手)


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感觉有问题,你的化合物是如何加入到细胞的?化合物有挥发性吗?还有你的化合物加入的时候对细胞的数量以及化合物的制备有没有问题?再算一下给药剂量,还有你可以用文献中最大的剂量,建议做个细胞爬片,HE染色看一下
6楼2010-06-23 10:27:35
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wangxiaoli6

新虫 (初入文坛)

★ ★
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472514568(金币+1):谢谢回帖! 2010-06-23 22:49:33
我做过不少细胞毒性实验,要确定细胞株的种类,细胞生长状态合适,加入药物时间,而且药物一定要溶解,要不肯定不行。你再看看哪个步骤出了问题
另外,你用的是癌细胞么,有的癌细胞养的时间过长可能会变性,考虑复苏新的细胞
7楼2010-06-23 10:37:18
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