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xjx11228

木虫 (正式写手)

[交流] 如何求酶促反应中最大反应速度?单位是什么?

问题:对于一个酶促反应,通常由米氏方程求米氏常数和最大反应速度以及催化反转常数,可是有关数据只是底物一系列浓度及所对应的吸光度值,请问如何求出米氏常数?尤其是这个最大反应速度的单位不好确定? 我是不是还缺少条件?文献都是10^-8 M s^-1,这个如何得出?谢谢各位了。

[ Last edited by xjx11228 on 2010-6-9 at 16:34 ]

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xjx11228

木虫 (正式写手)

哦,我懂了,如果我没有底物氧化产物的纯品,就无法得出最大反应速度了。如TMB,还要求做联苯醌的标准曲线图,从而求对应的反应速度。可是这个联苯醌的纯品有没有卖的呢?
7楼2010-06-13 12:37:47
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xiangyu2888

金虫 (正式写手)

xjx11228(金币+3, 博学EPI+1): 2010-06-12 19:22:24
你的吸光度值【A】不能直接用作求算最大反应速度的参数,而是应该转换成产物浓度【Y】mol/L(这一步用标准曲线就可以得出),通过短时间t内的产物浓度的变化求出初反应速度r0,(mol/L.s)。假设你的底物浓度为【S】,则将底物浓度的倒数1/[S]作为横坐标,将反应初速度的倒数1/r0作为纵坐标作图,做出来的图上面就有最大反应速度和米氏常数这类的参数了,单位就是mol/(L.s)
天天向上!!
2楼2010-06-11 09:37:53
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xjx11228

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xiangyu2888 at 2010-06-11 09:37:53:
你的吸光度值【A】不能直接用作求算最大反应速度的参数,而是应该转换成产物浓度【Y】mol/L(这一步用标准曲线就可以得出),通过短时间t内的产物浓度的变化求出初反应速度r0,(mol/L.s)。假设你的底物浓度为【S】 ...

非常谢谢你的回答。方法是对的。可是有一点还不明白。由A转换为浓度时由标准曲线来计算产物浓度。关键是这个产物浓度的标准曲线如何制得?还是用同一组数据?
如HRP对TMB底物的米氏常数和最大反应速度:
TMB浓度    Absorbance
1                       0.034
2                       .....
3                       .....
4
5
6
产物的浓度如何得到?测得A是底物氧化后产物的,是否由化学反应方程式得出。这样一来吸光度数值就没有用了。
是否有其它转换方法呢?用吸光度肯定不对,否则计算单位不对。
3楼2010-06-12 19:20:41
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xjx11228

木虫 (正式写手)

求助中。。。。。。。。。
4楼2010-06-13 09:55:07
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