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xjx11228

木虫 (正式写手)

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专业: 光谱分析

[交流] 如何求酶促反应中最大反应速度？单位是什么？

问题：对于一个酶促反应，通常由米氏方程求米氏常数和最大反应速度以及催化反转常数，可是有关数据只是底物一系列浓度及所对应的吸光度值，请问如何求出米氏常数？尤其是这个最大反应速度的单位不好确定？我是不是还缺少条件？文献都是10^-8 M s^-1,这个如何得出？谢谢各位了。

[ Last edited by xjx11228 on 2010-6-9 at 16:34 ]

回复此楼

1楼2010-06-09 15:04:32

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xjx11228

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by xiangyu2888 at 2010-06-11 09:37:53:
你的吸光度值【A】不能直接用作求算最大反应速度的参数，而是应该转换成产物浓度【Y】mol/L（这一步用标准曲线就可以得出），通过短时间t内的产物浓度的变化求出初反应速度r0,(mol/L.s)。假设你的底物浓度为【S】 ...

非常谢谢你的回答。方法是对的。可是有一点还不明白。由A转换为浓度时由标准曲线来计算产物浓度。关键是这个产物浓度的标准曲线如何制得？还是用同一组数据?
如HRP对TMB底物的米氏常数和最大反应速度：
TMB浓度 Absorbance
1                      0.034
2                      .....
3                      .....
4
5
6
产物的浓度如何得到？测得A是底物氧化后产物的，是否由化学反应方程式得出。这样一来吸光度数值就没有用了。
是否有其它转换方法呢？用吸光度肯定不对，否则计算单位不对。