| 查看: 3583 | 回复: 14 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】发酵液中氨基氮的测定 已有12人参与
|
|||
| 有没有简单一点的，凯氏定氮法太麻烦了， |
回复此楼» 猜你喜欢
人气不行了
已经有10人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有6人回复
-
我面上完蛋了
已经有10人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有24人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有17人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有6人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有19人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有16人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有21人回复
-
估计是周四
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 发酵液中氨基氮测定
已经有15人回复
- 发酵液中活性成分分离的相关问题
已经有3人回复
- 怎么测定氨基氮的转化率?
已经有4人回复
- 请做发酵的大家一起来探讨一下自己在发酵过程中都检测那些指标
已经有8人回复
- 发酵液中脂肪酶的活力用什么方法测定
已经有14人回复
- 发酵液中蛋白质的提取
已经有11人回复
- 哪位大侠有酵母发酵液中磷含量测定的具体方法
已经有5人回复
- 拜求各位大侠：怎样测定发酵液中菌丝体浓度？
已经有23人回复
- 【求助/交流】测定发酵液糖和氮含量的方法
已经有3人回复
85715623
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 4952.7
- 红花: 2
- 帖子: 585
- 在线: 60.1小时
- 虫号: 669907
- 注册: 2008-12-07
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
3楼2010-06-09 08:25:15
reasonspare
木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 贵宾: 0.894
- 金币: 2137.1
- 红花: 11
- 帖子: 1909
- 在线: 72.5小时
- 虫号: 180928
- 注册: 2006-02-10
- 专业: All in one
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):热心的斑斑~~ 2010-06-09 19:06:24
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):热心的斑斑~~ 2010-06-09 19:06:24
|
To 虫友：你说的问题很有问题： 测定氨基酸的含量的方法不下百种，关键看你要解决什么问题：要搞清你要做什么。 凯氏定氮法：测的全氮，而不是氨基酸。 另外，你是测定所有氨基酸的含量还是某种氨基酸的含量：α-氨基氮的测定（茚三酮法，见附表） 如果想知道所有的氨基酸的种类和含量：ＨＰＬＣ就完全可以。见附图，18种氨基酸一下子定性定量分析全有了。 α-氨基氮的测定（茚三酮法） 1、实验试剂 a显色剂 100克磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O） 60克磷酸二氢钾（KH2PO4） 5.00克水合茚三酮 3.00克果糖 用水溶液溶解后稀释至1升（此溶液在低温下用棕色瓶可保存2周，pH应为6.6-6.8。操作时可以按比例配成100ml）。 b稀释溶液：2克碘酸钾溶于600ml水中，再加入96%乙醇400ml. c标准溶液：溶107.2mg甘氨酸于100ml水中，0℃贮藏。用时按要求稀释。该溶液含有200mgα-氨基氮/升。 2、实验操作 取糖化的麦芽汁1.00ml（或者是其他的合适量，使稀释后的浓度为1-3mgα-氨基氮/升），放入100ml的容量瓶中，稀释到刻度，摇匀。 标准甘氨酸溶液稀释液：取1.00ml标准溶液，在100ml的容量瓶中稀释到刻度。 取麦芽汁稀释溶液、水、标准的甘氨酸溶液（三个）稀释液各2.00ml，放入比色管中，（水用于空白对照），各比色管中分别加入1.00ml的显色剂，摇匀，在沸水中加热16min。（此时应该准备20℃的水浴） 20℃水浴中冷却20min。 加入5.00ml的碘酸钾稀释溶液，摇匀，在30min内于570nm处测定吸光度值。 3、计算 游离的α-氨基氮（毫克/升麦芽汁）=2×100× 样品溶液吸光度值 / 标准溶液平均吸光度  [ Last edited by reasonspare on 2010-6-9 at 06:11 ] |
2楼2010-06-09 06:09:40
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):很不错，感谢分享~~ 2010-06-09 19:09:07
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):很不错，感谢分享~~ 2010-06-09 19:09:07
|
公司SOP中抄出来的。 氨基氮化验方法 1 原理 氨基与中性甲醛反应，生成中强酸，可用氢氧化钠标准溶液滴定。 反应式：4NH4 ＋ + 6HCHO = (CH2)6N4H＋ + 6H2O + 3H＋ RCHNH2CH2 + HCHO+ = RCH(NCH2)COOH + H2O OH- + H＋= H2O 2 试剂配制 2.1 18％中性甲醛溶液：量取分析纯甲醛溶液2000ml于2000ml试剂瓶中，加入2000ml纯化水，摇匀。临用前倒入1000ml的试剂瓶中，以酚酞为指示剂，用0.03569mol/l的NaOH溶液滴定至微红色。 2.2 甲基红指示剂：称取0.1g甲基红，用无水乙醇溶解并稀释至100ml。 2.3 酚酞指示剂：称取1.0g酚酞，用无水乙醇溶解并稀释至100ml。 2.4 盐酸(0.1mol/l)、氢氧化钠(0.03569mol/l)标准溶液：略。 3 测定 精密量取样品00ml至250ml锥形瓶中，加入20ml纯化水，甲基红指示剂3滴，用0.1mol/l盐酸滴定至红色，放置3min，用0.03569mol/l氢氧化钠溶液滴定至黄色。加入18%中性甲醛5 ml，摇匀放置3～5min。加入3滴酚酞指示剂，用0.03569mol/l氢氧化钠标准溶液滴定，到达滴定终点时溶液由黄色变为微红色，记录消耗的氢氧化钠标准溶液体积。 4 计算 N(μg/ml)＝ M×VNaOH÷V样品×m×1000 ≈ 100VNaOH 式中： M 为氢氧化钠标准溶液浓度，mol/l； VNaOH 为滴定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml； V样品 为量取样品的体积，ml； m 为氮原子摩尔质量，14。 |
4楼2010-06-09 11:44:31
5楼2010-06-09 13:36:24
20