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woowe97417

木虫之王 (文坛精英)

[交流] 【求助/交流】DH5α对氯霉素的敏感实验,急! 已有4人参与

要转一个带氯霉素抗性的质粒到DH5α保存,但是发现用的DH5α对氯霉素不敏感,氯霉素是用无水乙醇配的,有做过类似实验的站友帮忙解答一下,谢谢啦!
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):good idea!:tiger37: 2010-06-08 22:52:29
没有什么关系嘛,你直接转化划到板子上,就可以直接保存了~
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2010-06-08 15:32:23
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woowe97417

木虫之王 (文坛精英)

★
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-06-08 22:52:35
DH5α对氯霉素的不敏感的话,质粒转进去后就有很多假阳性,挑不到我需要的单克隆!
3楼2010-06-08 15:37:26
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-08 22:52:49
能换载体的话,筛选标记尽量不要用氯霉素抗性

或者加大氯霉素浓度,另外就是找找看有没有同类的抗生素

很多菌株莫名其妙的抗低浓度氯霉素,平时用的时候氯霉素浓度也比其他抗生素要大得多,可能也是考虑到这个现象
4楼2010-06-08 17:18:07
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sdluqun

铁杆木虫 (著名写手)

板砖队长

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不知道你氯霉素的用量如何?我们的质粒就是氯霉素抗性,一直做问题不大
尔非我焉知我悲喜
5楼2010-06-09 10:34:06
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