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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】请教：调节流动相问题？
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wolfmanh

[交流] 【求助】请教：调节流动相问题？ 已有6人参与

各位大侠，本人处理狗空白全血上液相感觉杂质很多主要在9分钟以前，问题是杂质峰拖尾影响后面的主药出峰，引起基线漂移，最郁闷的是主要出峰的位置空白血也有小峰，想调节流动相错开，调了几次但几乎都在一个位置出峰分不开，请问怎么办？
   新买的shim-pack C18柱子，柱温70，流动相先前用乙腈：甲醇：水=70：8：22，现在不用甲醇了，检测波长210nm.
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1楼 2010-06-08 13:50:37
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wolfmanh

引用回帖:
Originally posted by myhy12 at 2010-06-09 00:59:27:
柱温有必要那么高吗?柱温过高出峰早不易分开！另外查一下试剂会不会引入干扰！

主要是检测的主药在血浆跟血细胞里面都溶，大约各占50%吧 不稳定 所以只有测全血。处理过程是看了文献综合后的方法 大部分都是这么处理的，现在在尝试流动相中加入磷酸，三乙胺试下 能不能去杂质，实在不行跑梯度，这个波长基线是不是漂的厉害，固相萃取暂时没仪器做不了啊

固相萃取我有柱子但是没有仪器 ，还能怎么做?
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9楼2010-06-09 16:54:45
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白巧克力

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要不跑跑剃度试试？
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停止堕落
2楼2010-06-08 15:16:51
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s1d2w2

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
472514568(金币+1):谢谢回帖！ 2010-06-08 18:59:35
柱温那么高呀 ，你把流速降低，乙腈降低调试 不行就跑梯度吧
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3楼2010-06-08 17:08:49
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wolfmanh

引用回帖:
Originally posted by s1d2w2 at 2010-06-08 17:08:49:
柱温那么高呀 ，你把流速降低，乙腈降低调试 不行就跑梯度吧

样品处理过程如下：取全血1ml置于10ml,加一定量内标，加入NaOH溶液2ml,涡旋2min，加无水乙醚(重蒸）4ml,涡旋5min，3000 转每分钟离心15分钟，取乙醚层40度水浴氮气吹干，加入酸化甲醇溶液（盐酸：甲醇=1：3）200微升重组，加正己烷0.5ml涡旋30秒，3000转每分钟离心10分钟，弃去正己烷层去下层清夜20微升进样。
   大家看处理过程有什么问题？怎么优化？
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4楼2010-06-08 22:29:37
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