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【求助】关于HPLC的色谱分析和光谱分析的问题，请老师们赐教！已有2人参与
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今天遇到一个比较麻烦的HPLC分离问题，我的产物（有羧基，喹啉酮基团，苯丙氨酸基团），利用参考文献说是328nm（21.4 X 250 mm C18 反相柱(Dynamax 60 A ）作为激发波长，我使用了（Zorbax SB-C18，9.4X150， 80A; ）328nm和210nm，230nm，其参考吸收波长是600nm。但色谱结果表明，210和230nm的峰在10min内全部同时出来，而328nm这个激发根本没有峰，请问为什么？采取328nm作为检测波长的理由是： 1，参考文献是那个波长， 2，我自己利用分光光度计扫波谱的结论：我这里没有Uv分光光度计，只有荧光分光光度计。我将产物，用328nm激发，在PE公司的LS-55荧光分光光度计扫描波普，发现328nm激发确实有荧光350-500nm，最大发射峰位置410nm。反过来，使用该仪器在410nm发射峰扫描出的激发波谱在310-400nm为激发波谱，最大激发峰在375nm。我认为，既然在310-400nm是激发谱，肯定在328nm有吸收。 请问我以上的做法是否正确？什么波长为我检测的最佳波长？多谢！ [ Last edited by 86397520 on 2010-5-28 at 11:12 ] |
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platto
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- 专业: 色谱分析
2楼2010-05-28 11:32:06
3楼2010-05-31 13:14:12
4楼2010-06-05 09:22:14