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pkming

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】液相柱堵了怎么办已有14人参与

柱子:X-Bridge C18(4.6*150,3.5)
流动相:A: 0.1M NaAc水溶液+乙腈(93+7),用乙酸调pH=6.5; B:乙腈+水(80+20)。梯度洗脱       
样品:氨基酸和异硫氰酸苯酯(PITC)衍生化得到。
做2次就被堵了,保留时间前移1min左右,柱压在1ml/min水流动相时已经超过最大值4000。经检查确实是柱子堵了。分析可能是盐沉积或者样品吸附在色谱柱上,就用超纯水/甲醇(95/5)冲洗1d,后用水-甲醇-四氢呋喃-甲醇-水冲洗一天,后用水以0.05ml/min反冲洗40min,柱压有所下降,但是还是比高(水/甲醇95/5以0.5ml/min冲洗柱压还有3000之高)

着是无奈,请各位虫虫伸出援助之手,指点一二。必感激涕零
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jsdy288

新虫 (初入文坛)


pkming(金币+1):谢谢参与
pkming(金币+1): 2010-05-28 18:28:53
我十几年前也做过PITC衍生氨基酸,但没发生你所说的情况。上面几位说得有道理,我也处理过堵的情况,补一句:反冲时最好柱出口一头直接接废液瓶,以免颗粒又堵在检测器中。
如实在不行,可以把柱头卸开,挖掉几毫米填料,再补些同样的填料,基本和新的差不多。
15楼2010-05-28 16:49:02
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