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老夏853铁杆木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】有没有做土壤微生物群落多样性的 可以进来交流一下 已有10人参与
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RT土壤中微生物多样性， 用细菌 或者真菌 16s RNA基因通用引物做PCR之后做多样性分析 在PCR这步试验中，从土壤中提取基因组后作PCR,真菌很容易能P出来 但是细菌却很难 往往条带弥散~~如图  1 如果说 震荡剧烈使得基因组破碎，但是在做真菌PCR的时候 一半是用涡旋振荡仪混匀的 但是也能够P出来 而且很亮 2 如果说 模板量多少，这个我已经做了很多 梯度，不稀释，稀释10倍 稀释50倍，100倍都做了 3 如果说引物不对，用的是 通用引物，而且合成的公司也是做生物很专业的 公司 4 退火温度，这个不好说 我觉得退货温度上下差几度 就算效果不好 也不可能一点都没有 5 PCR 仪器，两台 bio-rad 都用了 结果还是那样 6 杂质的问题，从纯细菌中提取的基因组 杂质蛋白很多 如图  但是P出来时这样  就这么多了 各位帮忙分析一下吧 ！！！ |
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7楼2012-02-14 15:18:45
老夏853
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