应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】能不能pcr后产物直接酶切？
111/2返回列表12下一页
查看: 1223  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

michaelchen

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】能不能pcr后产物直接酶切？ 已有10人参与

请问各位有人做过pcr扩增后直接对产物进行酶切，不通过胶回收的吗？我的pcr产物量太少了，回收后都看不到了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-19 10:56:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):同意 2010-05-19 11:10:35
本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2010-05-19 11:10:13
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

jasco

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-05-19 12:31:11
如果条带单一，可以溶液回收后再切，pcr产物直接酶切效果不好
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-05-19 11:23:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

humants

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):good！ 2010-05-19 12:31:18
如果不打算做TA克隆，要注意引物设计的时候在5‘端多加几个辅助碱基，增加酶切效率，要不很难切开
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-05-19 11:28:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

霖希

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流！ 2010-05-19 12:31:25
好像说Pcr的系统环境和酶切的不一样，所以应该都是纯化回收一下再切。量少可以一次多p一点。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-05-19 11:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

012599

木虫 (小有名气)

guangliang

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该都是纯化回收一下再切
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-05-19 12:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jarvis2010

木虫 (职业作家)
纯化回收一下再切
赞一下 回复此楼
7楼2010-05-19 12:31:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):同意~~ 2010-05-19 16:53:55
如果你的pcr体系是50ul，一般就可以直接把溶液纯化后酶切，不用割胶~~
25ul体系就太少了，没什么东西。
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-05-19 13:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

miya173

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 16:54:18
buffer不一样，可能会有影响。
如果你的pcr产物很特异，就直接做个pcr产物回收，不用做胶回收。
如果不特异，就多扩增几管，一起做胶回收，用少量的溶液洗脱。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2010-05-19 14:23:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

银杏下

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得你可以把关注点放在如何提高PCR产量，因为正常情况下PCR结果都会比较好。当然你也可以不用切胶直接清洗回收试下。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-05-19 15:37:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 michaelchen 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭